Содержание

Гинекологический мазок на флору — Клиника Здоровье 365 г. Екатеринбург

Гинекологический мазок – простой и быстрый  лабораторный метод исследования нормальной и патогенной флоры под микроскопом. Для информативности мазков, перед посещением врача женщина не должна проводить санации влагалища, пользоваться вагинальными препаратами и иметь половые контакты (в течение 48 часов), т.к. все перечисленное может изменить микроскопическую картину. Забор осуществляется врачом-гинекологом одноразовым шпателем из трех точек – из наружного отверстия уретры («U»), влагалища («V») и шейки матки («C»). Взятый материал распределяется на предметное стекло, высушивается и направляется в лабораторию на микроскопию. Разные части клеток и бактерии окрашиваются в разные цвета, что позволяет оценить состав выделений из уретры, влагалища и шейки матки.

 

 

В данном мазке могут быть обнаружены:  

 

 

Плоский эпителий

– слой клеток, выстилающий влагалище и шейку матки. В норме эпителий должен присутствовать. Отсутствие его в мазке свидетельствует об атрофии эпителиальных клеток.

 

Лейкоциты

– норма до 15 единиц в поле зрения (в мочеиспускательном канале до 5, во влагалище до 10 и в шейке матки до 15 единиц в поле зрения). Количество лейкоцитов в мазке резко возрастает при воспалении влагалища (кольпит, вагинит). Чем больше лейкоцитов, тем острее протекает заболевание.   При остром воспалении значение этого показателя будет «до 100 в поле зрения» или «покрывают все поле зрения».

 

Палочки

в мазке составляют нормальную микрофлору влагалища. Кроме палочек в мазке не должно быть других микроорганизмов.

 

«Ключевые» клетки

в мазке — это гарднереллы – возбудители гарднереллеза. Дрожжевые грибы – признак кандидоза (молочницы). В скрытых (бессимптомных) стадиях молочницы грибок в мазке может обнаруживаться в виде спор.

 

Лептотрикс (Leptothrix) — анаэробная грамотрицательная бактерия. Чаще всего лептотрикс встречается при смешанных половых инфекциях  —  трихомониазе и хламидиозе, при кандидозе и бактериальном вагинозе. Определение его в мазке должно настораживать врача и предусматривать дальнейшее более углубленное обследование.

 

 

Мобилункус анаэробный микроорганизм, один из представителей транзиторной микрофлоры мочеполовых органов. Часто встречается у женщин с бактериальным вагинозом и кандидозом.

 

 

Трихомонада – простейший микроорганизм, представляет собой подвижный одноклеточный организм со жгутиком, вызывающий воспалительные заболевания мочеполовой сферы.

 

 

Гонококки (диплококки) – возбудители гонореи — в мазке норме не определяются.

 

что это такое в гинекологии, лечение, опасность при беременности

Время чтения: 4 мин.

Флора влагалища многообразна. Ее состав может отличаться у разных женщин, но основу, как правило, составляют лактобациллы.

При обнаружении лептотрикса в мазке не всегда необходимо лечение. Микробиологическое значение  лептотрикса учеными еще до конца не установлено.

Лишь у 1% женщин эти микроорганизмы становятся причиной вагинита, нарушения микрофлоры и осложнений беременности.

1. Особенности возбудителя

Leptothrix – это грамотрицательные, нитчатые бактерии, которые не образуют спор, предпочитают анаэробную среду с очень малым содержанием кислорода (такие бактерии называются микроаэрофильными).

Их название происходит от латинских слов, в переводе означающих «тонкий волос». В мазке лептотрикс имеет вид длинных тонких или толстых палочек, которые располагаются цепочками, напоминающими волоски. Внешнее сходство с грибками актиномицетами привело первоначально к ошибке классификации: долгое время leptothrix относили к грибам.

Их обычно объединяют под общим названием рода Leptothrix species (spp.).

Часть исследователей относят лептотрикс к особой разновидности лактобацилл, измененных под влиянием условий среды.

Они заметили, что у некоторых женщин, которые обращаются к гинекологам с жалобами на обильные выделения, в мазках обнаруживаются бактерии, которые образуют длинные цепочки.

У женщин, у которых отсутствуют симптомы инфекции, лактобактерии группируются в цепи длиной от 5 до 15 мкм. У женщин с жалобами на обильные выделения длина одной цепочки может достигать 40-75 мкм.

До сих пор в медицинской литературе названия бактерий лептотрикс и лептотрихии считаются синонимами. Это обусловлено путаницей и трудностью их культивирования.

Внимание! В новых классификациях это два разных рода — Leptothrix и Leptotrichia! Будьте внимательны, бактерии вызывают совершенно разные заболевания!

2. Какие симптомы могут наблюдаться?

Лактобациллы начинают преобладать в микрофлоре влагалища после наступления полового созревания. Но почему возникает инфекция, вызванная лептотриксом, точно не известно.

Существует мнение, что бактерии часто появляются после самодиагностики и неправильного лечения кандидоза. Препараты против молочницы легко доступны, а женщины зачастую пропускают приемы гинеколога.

Лептотрикс часто сочетается со следующими возбудителями:

  1. 1Трихомонады.
  2. 2Гарднереллы.
  3. 3Кандиды.
  4. 4Хламидии.

Проявления инфекции неспецифические, в западной литературе ее иногда называют термином «лактобациллез». Она не передается половым путем, у мужчин никаких проявлений не возникает.

У женщины наиболее часто наблюдаются следующие симптомы:

  1. 1Обильные, белые или прозрачные выделения из влагалища без неприятного запаха и комочков, иногда напоминающие воду.
  2. 2Зуд и жжение во влагалище и области вульвы.
  3. 3Кислотность влагалищной среды остается в норме.
  4. 4Иногда женщина жалуется на дискомфорт и жжение при мочеиспускании.
  5. 5При осмотре врач, как правило, не видит покраснения стенок влагалища и отека — явных признаков воспаления.

Жалобы часто появляются во вторую фазу цикла, при приближении менструации. Есть данные, которые свидетельствуют, что высокие концентрации перекиси водорода и молочной кислоты во влагалище приводят к повреждению клеток эпителия, нервных окончаний, что может стать причиной развития вульводинии.

При беременности выявление лептотрикса также сопровождается обильными жидкими выделениями, от которых постоянно промокает белье.

Лептотрихоз, то есть инфекция, вызванная лептотрихиями, характеризуется немного другой симптоматикой:

  1. 1Увеличение количества влагалищных выделений, изменение их цвета (серый, бело-серый).
  2. 2Появление неприятного запаха, типичного для баквагиноза.
  3. 3Смещение кислотности в щелочную сторону.
  4. 4Болезненность при половом акте (диспареуния).
  5. 5Зуд и жжение во влагалище.

Один из видов лептотрихий — Leptothrix amnionii — может стать причиной следующих осложнений:

  1. 1Преждевременное прерывание беременности.
  2. 2Хориамнионит.
  3. 3Низкий вес плода при рождении.
  4. 4Послеродовый сепсис у иммуносупрессивных рожениц.
  5. 5Инфицирование новорожденного.

Выявление этого возбудителя наблюдается крайне редко.

3. Методы диагностики

В гинекологии первым этапом диагностики является осмотр в зеркалах и бимануальное исследование. При осмотре врач не заметит никаких изменений во влагалище или на шейке матки.

Двуручное исследование при отсутствии воспаления в придатках и матке безболезненно. Кислотность влагалищной среды в пределах нормы.

  • Лептотрикс выявляется в простом мазке на флору. Его характерный признак – расположение в виде длинных тонких цепочек по принципу «точка-тире».
  • Современным методом диагностики является анализ «Фемофлор». Он отличается быстротой получения результата, а также способностью обнаруживать разных представителей нормальной флоры и подсчитывать их количество.

Нормальным значением считается 104. При превышении этого показателя диагностируется дисбиоз или неспецифический вагинит.

Дифференциальную диагностику проводят с вагинальным кандидозом, бактериальным вагинозом. Каждая из этих патологий имеет характерные симптомы, которые позволяют легко отличить их друг от друга.

4. Надо ли лечить?

Стандартные схемы лечения лептотрикса не разработаны. Однако оно показано не всем женщинам.

Необходимым условием является наличие признаков воспаления, которое подтверждено лабораторно (в мазке количество лейкоцитов и клеток эпителия выше нормы).

Опыт западных исследователей говорит, что для терапии достаточно применения амоксициллина-клавуланата (Аугментин, Амоксиклав) по 500 мг внутрь три раза в день, каждые 8 часов. Курс лечения составляет 7 дней.

При аллергии на пенициллины альтернативой является доксициклин по 100 мг два раза в день в течение 10 дней.

Антибиотики действуют неизбирательно и могут привести к уничтожению нормальной микрофлоры. Поэтому после курса лечения необходимо выполнить повторный мазок, чтобы решить вопрос о необходимости восстановления биоценоза влагалища.

Несмотря на отсутствие рекомендаций, наша редакция считает возможным лечение инфекции с помощью местных вагинальных препаратов:

  1. 1Клиндамицин (Далацин), вагинальные свечи и крем.
  2. 2Тержинан, Полижинакс, вагинальные таблетки и капсулы.

Народная медицина предлагает свои методы лечения заболевания. Отзывы о нем носят субъективный характер, научно обоснованных доказательств эффективности лечения нет.

В некоторых случаях эти средства могут оказаться опасными из-за риска восходящей инфекции, например, при спринцевании.

Вагинальный лактобациллез нельзя назвать болезнью. Это состояние дисбиоза, при котором нарушен баланс нормальной микрофлоры в организме.

Лечение необходимо только в случае выраженных симптомов, которые нарушают самочувствие женщины. Использование рекомендованных схем позволяет избавиться от признаков патологии в 86% случаев.

ИДЦ — Иркутский диагностический центр

Исследование мазка на микрофлору (женщины) (качественный)

Описание услуги

Код услуги:

2Ж4008

Готовность результатов:

через 2 рабочих дня, после 13:00

Как правило, каждое посещение врача-дерматолога, гинеколога подразумевает забор урогенитального мазка, в котором затем в лаборатории оценивается состояние обычной микрофлоры, микрофлоры сопровождающей бактериальный вагиноз (в мазке обнаружены ключевые клетки гарднереллы, мобилюнкус, лептотрикс), дрожжеподобных грибов, количественная оценка присутствующих клеточных элементов (лейкоцитов, эпителия), а также присутствие или отсутствие такой патогенной флоры (гонококки, трихомонады). Бактериальный вагиноз — не является заболеванием, передаваемым половым путём. Это — дисбактериоз влагалищного биотопа. Широкое распространение бактериального вагиноза, выявляемого у 20-30% женщин репродуктивного возраста, развитие осложнений, которые связывают с этим заболеванием — невынашивание беременности, амниотическая инфекция, послеродовый и послеабортный эндометрит, сальпингит, сальпингоофорит, раневая инфекция и др. — обусловливают актуальность данной патологии. В норме микрофлора влагалища представлена, в основном, лактобациллами, палочками Додерлейна, которые создают неблагоприятные условия для размножения патогенных микроорганизмов. При бактериальном вагинозе происходит изменение микробиоценоза влагалища: резкое снижение или отсутствие лактобактерий, преобладание бактероидов, пептострептококков, гарднерелл, микоплазм, мобилункуса, и других анаэробов. Развитию бактериального вагиноза могут способствовать эндогенные (изменение гормонального статуса, снижение иммунологической реактивности, нарушение микробиоценоза кишечника) и экзогенные факторы (предшествующая антибактериальная терапия, перенесенные и сопутствующие воспалительные заболевания мочеполового тракта, применение гормональных средств, иммунодепрессантов). Факторами риска для развития бактериального вагиноза являются: частая смена половых партнеров; использование внутриматочных контрацептивов; воспалительные заболевания мочеполовой сферы; прием антибактериальных препаратов и иммунодепрессантов. Несмотря на то, что бактериальный вагиноз чаще встречается у женщин, имеющих многочисленных половых партнеров, и редко диагностируется у женщин, не живущих половой жизнью, это заболевание не является истинным ЗППП. Клиника и симптомы. Клинические проявления не имеют характерных признаков, однако можно выделить наиболее частые симптомы и признаки. Обильные однородные кремообразные выделения серовато-белого цвета, прилипающие к стенкам влагалища. Выделения часто имеют неприятный (рыбный) запах, который возникает в результате распада аминов, вырабатываемых анаэробными бактериями. Признаки воспаления влагалища. Вульвовагинальное раздражение в виде зуда и жжения, а также неприятные ощущения при половом акте. Точная диагностика бактериального вагиноза возможна при применении микроскопического исследования. При этом выявляются специфические для этой инфекции т.н. «ключевые клетки». Урогенитальный кандидоз – грибковое заболевание слизистых оболочек и кожи мочеполовых органов, вызываемое дрожжеподобными грибами Candida. Это заболевание является достаточно частым, протекает хронически и склонно к рецидивам. Возбудителем урогенитального кандидоза наиболее часто является Candida albicans. Род Candida насчитывает более 150 видов. Для человека опасны лишь некоторые 7 из них. Грибы кандида обитают в окружающей среде, достаточно часто могут быть также найдены и на кожи и слизистых оболочках человека. Подсчитано, что из 100 млн. ежегодных визитов к врачам по поводу вагинита около 20-25% обусловлены кандидозом. Приблизительно 75% женщин переносят в течение своей жизни по крайне мере один эпизод кандидоза и у 40-50% из них развивается, по крайней мере, один рецидив. Генитальный кандидоз наиболее часто регистрируется в странах с жарким климатом и невысоким уровнем санитарной грамотности населения. Возбудители урогенитального кандидоза распространяются половым путем, при этом определенную роль играют различные факторы: физиологические состояния организма (возраст, гормональный статус, например беременность), наличие эндокринологического заболевания (диабет, ожирение, синдром Кушинга, полиэндокринопатия, гипотиреоз), новообразования, инфекционные заболевания, истощение, медикаментозные факторы: антибиотики, кортикостероиды, цитостатики, оперативные вмешательства, применение гормональных контрацептивов. Клиника и симптомы. Чаще всего встречается кандидозное поражение женских половых органов (вульвовагинт). Увеличение количества отделяемого из влагалища. Необычно белый с «молочными» бляшками цвет отделяемого. Зуд, чувство жжения или раздражения в области наружных половых органов. Повышенная чувствительность слизистых к воде и моче. Усиление зуда и болезненных ощущений после полового акта. Неприятный запах, усиливающийся после полового акта. У мужчин это заболевание встречается гораздо реже. Гонорея — одно из наиболее распространенных венерических заболеваний. Возбудитель гонореи — гонорейный диплококк Neisseria gonorrhoeae. Заражение происходит при половом акте, через руки инфекция может распространиться на глаза. Симптомы заболевания: жжение при мочеиспускании, рези, гнойные желтовато-зеленые выделения из мочеиспускательного канала и его отек, боли. Проявление болезни начинают появляться через 2-7 дней после заражения. Осложнения: воспалительные заболевания мочеполовых органов, бесплодие, импотенция, артриты. Для диагностики гонореи исследуется выделения из половых органов методом микроскопии после окраски мазка специальными красителями. Если в мазке гонококк не обнаружен, но имеются подозрения на заражение, рекомендуется посев на специальные среды для выращивания культуры бактерий, вызывающих гонорею. Этот анализ особенно важен при хронической, недолеченной гонорее. Если нет выраженных симптомов заболевания, врач может использовать различные методы провокации. При подозрении на гонорею у мужчин исследуют отделяемое из мочеиспускательного канала (до мочеиспускания), секрета предстательной железы; у женщин — отделяемое из уретры, цервикального канала. Контроль излечимости проводят через две недели после окончания лечения антибиотиками, затем — диспансерное наблюдение в течение 3-х месяцев с клинико-лабораторным обследованием 1 раз в месяц. Необходимо обследовать половых партнеров.

Забор материала в кабинете врача. Мужчинам рекомендуется не мочиться в течение 6-8 часов перед взятием пробы. Женщинам нельзя применять спринцевание в течение 24 часов перед исследованием и за сутки до исследования необходимо исключить применение интравагинальной терапии. 

Гинекологический мазок в Санкт-Петербурге, цена услуги в Выборгском районе

Эта процедура является разновидностью исследования выделений из влагалища с целью диагностики. Во время посещения гинеколога обычно берется мазок на степень чистоты и флору. Это простой способ обнаружить болезнетворные микроорганизмы, которые вызывают молочницу, бактериальный вагиноз, вагинит и пр. 

Мазок на флору берут:

  • если есть выделения из влагалища;
  • если беспокоят боли внизу живота;
  • если ощущается зуд или жжение во влагалище;
  • если длительно принимались антибиотики;
  • если планируется беременность;
  • если идет профилактический осмотр и пр.

Как подготовиться к сдаче мазка?

За день-два до планируемого взятия мазка наши гинекологи рекомендуют исключить спринцевания и половые контакты, а также применение лубрикантов, вагинальных таблеток, кремов и свечей. Мазок не сдают во время менструации, поскольку выделения искажают общую картину. Пару часов до планируемого похода к врачу не следует мочиться. Обмывание половых органов накануне визита к гинекологу проводить теплой водой без мыла.

Мазок лучше всего сдавать в первые два-три дня после менструации или перед началом следующего цикла. 

Как расшифровать мазок?

В результате лабораторного исследования вашего мазка на флору могут указываться такие данные:

Лейкоциты. Они должны присутствовать лишь в малых количествах. Норма содержания их во влагалище и мочеиспускательном канале – до 10 в поле зрения, и не больше 30 – в шейке матки. Повышение в мазке количества лейкоцитов говорит о том, что присутствует воспалительный процесс.

Несколько повышается норма их содержания в мазке при беременности – 20-30 в поле зрения.

Слизь. В норме она содержится в мазке в умеренном количестве, так как вырабатывается железами влагалища и цервикального канала.

Плоский эпителий. Эти клетки выстилают поверхность слизистой канала шейки матки, влагалища. Количество их зависит от фазы менструального цикла. Норма плоского эпителия в мазке – 5-10 клеток. Если он вообще не обнаружен, это может говорить об атрофии эпителиального слоя, а если количество клеток плоского эпителия повышено – о воспалении.

«Ключевые клетки». Это клетки плоского эпителия, покрытые гарднереллой (бактериями). Большое количество их в мазке указывает на гарднереллез.

Лактобациллы (палочки Додерлейна). Нормой является присутствие их в микрофлоре влагалища в большом количестве. Снижение их содержания говорит о бактериальном вагинозе.

Дрожжи. Они входят в небольшом количестве в состав микрофлоры влагалища, но их повышение более 104 КОЕ/мл, особенно на фоне творожистых выделений и зуда во влагалище – признак молочницы.

Лептотрикс. Эти анаэробные грамотрицательные бактерии встречаются при смешанных половых инфекциях (например, кандидоз и бактериальный вагиноз, трихомониаз и хламидиоз). Выявление их в мазке на флору предполагает назначение серьезного обследования.

Мобилункус. Анаэробный микроорганизм, который встречается у женщин с бактериальным вагинозом либо кандидозом.

Трихомонада. Это простейший одноклеточный микроорганизм, который в мочеполовой сфере вызывает воспалительные процессы.

Гонококки (диплококки). Это возбудитель гонореи. В норме они не должны обнаруживаться в мазке.

Кокки (стафилококки, стрептококки, энтерококки). Это условно патогенные микроорганизмы. В малом количестве они входят в нормальный состав флоры, а их увеличение говорит о наличии инфекции.

Кишечная палочка. Она должна присутствовать в норме в мазке только в малых количествах. Содержание в мазке кишечной палочки в большом количестве говорит о бактериальном вагинозе или попадании в мазок кала.

Буквами обозначаются зоны, откуда берут мазки: буквой «U» обозначается мочеиспускательный канал, «C» — шейка матки и «V» — влагалище.

На основе значения всех этих показателей определяют степень чистоты влагалища, отражающую состояние микрофлоры в целом.

Выделяют степени чистоты влагалища:

  1. Микрофлора влагалища в оптимальном состоянии. Характерна для женщин условно здоровых (крайне редко встречается).
  2. Отклонения микрофлоры незначительные. Наиболее распространена у условно здоровых женщин.
  3. Отклонения от нормы (большое количество грибов, условно-патогенных бактерий). Эта степень указывает на присутствие воспалительного процесса.
  4. Отклонения от нормы значительные. Говорит о бактериальном вагинозе и прочих половых инфекциях.

Гинекологический мазок – это предварительная ступень в диагностике заболеваний. Если в нем обнаружены отклонения, врач нашей клиники может назначить вам как повторный анализ, включающий в себя бакпосев и информацию на чувствительность к антибиотикам, так и диагностику методом ПЦР, выявляющем скрытые инфекции половой сферы.

Гинекологический мазок вы можете сделать в нашей клинике в Выборгском районе города, у метро Проспект Просвещения.

Смотрите также: Диагностика бесплодия, Лечение бесплодия, Прием врача гинеколога, Диагностика и лечение ИППП.

Воспалительные заболевания | Pro Cosmetic. Пластическая хирургия

I.БАКТЕРИАЛЬНЫЙ ВАГИНОЗ

Строго говоря, бактериальный вагиноз – БВ (устаревшее название – гарднереллёз) не является заболеванием, передаваемым половым путём. Это – дисбиоз влагалищного биотопа (проще говоря – дисбактериоз). В норме микрофлора влагалища представлена, в основном, лактобациллами, палочками Додерлейна, которые создают неблагоприятные условия для размножения патогенных микроорганизмов. При БВ количество лактобацилл резко уменьшается, их замещают анаэробные (развивающиеся в обеднённой кислородом среде) микроорганизмы: гарднереллы, мобилункус, бактероиды, пептострептококки, фузобактерии, вейлонеллы и др. Гарднереллы, обильно покрывающие поверхность эпителиальный клеток, являются достаточно надёжным диагностическим признаком классического бактериального вагиноза. Однако в сомнительных случаях возрастает роль вспомогательных микроскопических признаков БВ – например, присутствие микроорганизмов мобилункус и лептотрикс.

II.ХЛАМИДИОЗ

Хламидии имеют вид мелких грамотрицательных кокков. Это внутриклеточные паразиты с уникальным циклом развития, включающие две различные по строению и биологическим свойствам формы существования, которые обозначены как элементарные и ретикулярные тельца. Особенностью хлсмидий является то, что они развиваются только в эпителии особого типа, т.н. призматическим, поэтому поражаются органы, покрытые этим эпителием. Chlamidia pneumonia и Chlamidia psittaci, поражая эпителий дыхательных путей, прежде всего бронхов, вызывают хронические, реже острые, бронхиты и пневмонии (“воспаление лёгких”). Chlamidia trachomatis же, повреждая слизистую оболочку уретры, канала шейки матки, маточных труб приводит не только к острым воспалительным процессам, но и к хронизации с последующими осложнениями, наиболее грозным из которых является бесплодие.

Коварство хламидийной инфекции состоит в том, что у 3 из 4 женщин она протекает стёрто или вовсе незаметно. Вдвойне это опасно тем, что при беременности хламидии повреждают многие системы формирующегося плода, а при инфицировании в родах резко повышают угрозу пневмонии и коньюнктивита у новорождённых.

Chlamydia trachomatis относится к безусловно патогенным для человека микроорганизмам, а урогенитальный хламидиоз – к наиболее распространенным заболеваниям, передаваемым половым путем. Регистрация хламидиоза в России началась с 1994 г., и официальные статистические данные свидетельствуют о ежегодном удвоении числа случаев впервые установленного диагноза хламидийной инфекции.

Поражения мочеполовой сферы у человека вызывают так называемые урогенитальные серотипы хламидий (D-K). Существуют еще три L серотипа (I, II и III), являющиеся возбудителями венерической лимфогранулемы. Урогенитальный хламидиоз не имеет специфических клинических проявлений и патогномоничных симптомов, обычно протекает торпидно, мало- или бессимптомно. Первоначальным очагом инфекции чаще всего является слизистая уретры у мужчин и канала шейки матки у женщин. Кроме того, С. trachomatis может поражать и другие слизистые, покрытые цилиндрическим эпителием (прямая кишка, конъюнктива глаза и глотка). При болезни Рейтера С. trachomatis могут обнаруживатся в синовиальной жидкости.

Из заболеваний, которые хламидии способны вызывать у мужчин, чаще всего встречается уретрит и его осложнения: эпидидимит, простатит, реже – проктит. У женщин С. trachomatis чаще всего является причиной развития цервицита, его осложнениями являются сальпингит, сальпингоофорит, а также перигепатит, периаппендицит, пельвиоперитонит. Для женщин хламидийная инфекция представляет наибольшую угрозу из-за слабо выраженной симптоматики и связанными с этим поздней диагностикой и несвоевременным назначением лечения. Считается, что у 2/3 женщин субъективных симптомов заболевания может вообще не быть. С. trachomatis является одной из основных причин развития вторичного бесплодия у женщин. Показано, что выделяемый хламидиями при хроническом течении заболевания белок теплового шока, сходный по своему аминокислотному составу с человеческим, способен вызывать аутоиммунные процессы в области органов малого таза и развитие бесплодия. Кроме того, С. trachomatis может привести к появлению антиспермальных антител, что является еще одной причиной бесплодия.

Следует иметь в виду, что у новорожденных от матерей, больных урогенитальным хламидиозом, может развиваться хламидийный конъюнктивит, уретрит, вульвовагинит, артрит и поражения других органов. Для хламидийного процесса, в отличие от гонорейного, характерны более длительный инкубационный период (10-14 дней), наличие слизистых или слизисто-гнойных выделений из уретры и цервикального канала, а также фолликулярные образования на шейке матки (фолликулярный цервицит).

В связи с отсутствием в настоящее время общепринятой клинической классификации заболевания представляется целесообразным пользоваться на практике при постановке диагноза следующей терминологией: свежий (неосложненный хпамидиоз нижних отделов мочеполового тракта) и хронический (длительнотекущий, персистирующий, рецидивирующий хламидиоз верхних отделов мочеполового тракта, включая органы малого таза). Далее следует указывать топический диагноз, включая экстрагенитальную локализацию.

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА

Обследование на наличие хламидий даже при отсутствии симптомов заболевания рекомендуется проводить лицам, входящим в группы риска, сексуально активным девушкам-подросткам, особо подверженным заражению хламидийной инфекцией, если они часто меняют половых партнеров и не пользуются барьерными контрацептивами. Целесообразно также ежегодно проводить обследование женщин детородного возраста, особенно тех, кто использует гормональные контрацептивные средства, меняет половых партнеров, в анамнезе которых имеются указания на внематочную беременность и воспалительные заболевания органов малого таза.

Существуют следующие основные методы обнаружения хламидий: иммунофлюоресцентный, иммуноферментный, серологический, методы выделения возбудителя в культуре клеток и методы ДНК-диагностики (полимеразная и лигазная цепная реакция, ДНК-зонды). Каждый из этих методов имеет свои преимущества и недостатки. Раннее обнаружение хламидий является настолько важной предпосылкой предупреждения возможных осложнений, что нередко приходится использовать комбинацию нескольких методов обследования. При обнаружении хламидий хотя бы одним из современных методов рекомендуется проведение соответствующей антибактериальной терапии. Риск от использования антибиотиков при ложноположительных результатах значительно меньше, чем от длительного существования хламидийной инфекции в организме человека без своевременной терапии.

Для выявления хламидий наиболее информативным является культуральный метод исследования, который в силу высокой стоимости и трудоемкости не имеет в нашей стране широкого распространения. В настоящее время для экспресс-диагностики хламидиоза предпочтительно использовать метод прямой иммунофлюоресценции с моноклональными антителами. При этом следует учитывать, что исследованию подлежат не свободные выделения, а соскоб эпителиальных клеток. Недостаток метода – субъективность его оценки. Для массовых скрининговых обследований предпочтитеьно использовать иммуноферментный метод. Современные серологические методики, способные обнаруживать не только IgG, но также IgA и IgM, особенно важны для выявления инфекции в труднодоступных для взятия соскобного материала местах, осложненном течении урогенитального хламидиоза и болезни Рейтера. Культуральный метод очень важен при подозрении на наличие персистирующей инфекции, поскольку способствует выявлению цитоплазматических включений, характерных для такого течения хламидийной инфекции. Наиболее современными являются методы ДНК-диагностики, но эти методы требуют исключительно высокого качества реагентов и четкости соблюдения всей технологической цепочки от забора материала до интерпретации результатов, что до настоящего времени не позволяет использовать их в широкой практической деятельности.

Установление излеченности урогенитального хламидиоза следует проводить с учетом метода диагностики. Культуральное исследование проводится не ранее, чем через 2-3 недели после лечения в связи с возможностью получения ложноотрицательных результатов. Прямой иммунофлюоресцентный тест или ПЦР, выполненные ранее 3-4 недель после лечения, могут дать ложноположительные результаты из-за возможного сохранения нежизнеспособных микроорганизмов или их остатков. Обнаружение хламидий после указанных сроков контроля требует назначения повторного курса противохламидийной терапии препаратами других групп. Лабораторное обследование до и после лечения целесообразно проводить в одной и той же лаборатории, используя одни и те же диагностические тесты. Критериями излеченности урогенитального хламидиоза являются отрицательные результаты лабораторного исследования, отсутствие клинических симптомов заболевания. Следует также принимать во внимание данные обследования половых партнеров. Больных урогенитальным хламидиозом следует информировать о том, что их половые партнеры подлежат обследованию, а при необходимости и лечению. Следует рекомендовать больному воздерживаться от половых контактов без предохранения барьерным методом до тех пор, пока он и его половые партнеры не будут излечены.

III.ГОНОРЕЯ

Инкубационный период при гонорее составляет от 1 дня до 1 месяца (обычно 2 – 5 дней). У 15 – 30% больных инфекция смешанная: кроме гонококков в половых путях присутствуют хламидии, трихомонады и другие возбудители ИППП. Их присутствие не только удлиняет инкубационный период (что свидетельствует об ослабленной реакции организма), но и ухудшает результаты лечения. Особенно это касается трихомонад, фагоцитирующих (“заглатывающих”) гонококки, тем самым защищая последние от действия лекарственных веществ. Чаще всего гонорейная инфекция проявляется воспалением слизистых оболочек, сопровождающееся гнойными или слизисто-гнойными выделениями из мочеиспускательного канала (уретры) у мужчин, из уретры и шейки матки у женщин. В силу анатомических особенностей (большая протяжённость уретры и др.) выраженные болезненные ощущения чаще вынуждают мужчин обращаться за медицинской помощью. Вызванная нейсериями инфекция у женщин протекает более стёрто, несмотря на это, приводя к серьёзным осложнениям. Так, при обследовании бесполодных женщин мы не столь уж редко обнаруживали скрыто протекающую гонорейную инфекцию.

Источником заражения чаще являются больные с хроническими, малосимптомными формами гонореи, которые не считают имеющиеся у них симптомы свидетельством венерического заболевания. В этой ситуации эффективная диагностика инфекции, вызванной Neisseria gonorrhoeae, представляется весьма важной задачей.

Метод культивирования гонококков все еще может быть рекомендован в качестве золотого стандарта при соблюдении условий транспортировки и получения культуры.

Характерные признаки гонореи при бактериоскопии (“в мазке”):

1) Внутриклеточно расположенные,
2) грамотрицательные,
3) диплококки,
причём каждый из кокков имеет бобовидную форму.

Под действием неблагоприятных факторов гонококки переходят в так называемую L-форму, своеобразный анабиоз, вовремя которого они малочувствительны к антибиотику, вызвавшему их образование. L-формы гонококков обнаруживаются при скрытой и хронической гонорее. Не диагностируются микроскопически (в “мазке”), но определяются при посеве и, что точнее, при проведении ПЦР (“ДНК-диагностика”). СЭМ, х 20000.

IV.КАНДИДОЗ

Candida albicans является наиболее часто обнаруживаемым представителем урогенитальных микозов – группы инфекционных заболеваний слизистых оболочек и кожи мочеполовых органов, вызванных патогенными грибами. Урогенитальные микозы широко распространены, протекают хронически, склонны к рецидивам.

Различают урогенитальные кандидозы, вызванные дрожжеподобными грибами рода Candida (Candida spp, наиболее часто – Candida albicans, Candida krusei, Candida tropicalis, реже – Candida pseudotropicalis, Candida stellatoidea, Candida parapsilosis), также – дрожжеподобными грибами Torulopsis glabrata и урогенитальные дерматофитии – грибковые заболевания, обусловленные возбудителями поверхностных микозов – грибами из родов Epidermophiton, Trichophiton, Microsporum.

Дрожжевые грибы рода кандида – нередкий обитатель генитального тракта. Как и “ближайшие родственники” – дрожжи – питает слабость к сахарам. Поэтому рецидивирующий кандидоз может быть одним из признаков сахарного диабета. Болезнетворные свойства кандид в значительной степени зависят от состояния организма, в котором они обитают.

Полагают, что до 2/3 людей являются носителями (ногти, кишечник и т.д.) кандидозных бластоспор, но у большинства последние находятся в “спящем” состоянии. При беременности, приёме эстроген-содержащих препаратов (например, оральных контрацептивов), антибиотиков дрожжеподобные грибы “идут в рост”. Кандидоз – частый спутник сниженного иммунитета. Поэтому его относят к группе оппортунистических – сопутствующих СПИДу – заболеваний.

У женщин кандидозные воспалительные изменения могут ограничиваться наружными половыми органами (вульвит) или влагалищем (вагинит), но чаще наблюдается сочетанное поражение (вульвовагинит). Реже наблюдается уретрит и цистит (воспаление мочевого пузыря). Для мужчин характерны кандидозный баланопостит (воспаление крайней плоти), реже – уретрит (мочеиспускательного канала), простатит (предстательной железы), эпидидимит (придатков яичка) и цистит.

Клиническая картина урогенитального кандидоза в большинстве случаев не даёт оснований для установления диагноза, т.к. сходные признаки и изменения кожи можно наблюдать и при других воспалительных процессах в мочеполовых органах и болезнях кожи. Для постановки диагноза в этих случаях большое значение приобретают данные лабораторных исследований, которые могут включать:

1) микроскопический анализ материала, взятого из очагов поражения,
2) его посев с учётом степени обсеменённости поражённой ткани,
3) внутрикожные пробы с дрожжевым аллергеном,
4) серологические реакции – агглютинации и РСК (реакция связывания комплимента),
5) полимеразная цепная реакция.

Микроскопическое исследование является самым доступным методом, его можно использовать в условиях обычных поликлиник, где нет специальных лабораторий. При кандидозном поражении в патологическом материале наблюдают скопление 10 – 15 и более дрожжевых клеток, преимущественно с почкованием, во многих полях зрения микроскопа. Псевдомицелий содержится в большом количестве. При острых формах заболевания в мазках преобладают клеточные формы, при хронических – скопления псевдомицелия.

Культуральная диагностика (“посев”) играет важнейшую роль в постановке диагноза. Она позволяет установить вид гриба (что, как указывалось выше, практически невозможно при микроскопии), а также охарактеризовать степень обсеменённости грибами (определить количество дрожжевых клеток в единице объёма). Недостатком является необходимость специализированной бактериологической лаборатории, необходимость соблюдения определённых правил взятия и доставки материала, необходимость ожидания результатов роста гриба на питательных средах (несколько дней).

Внутрикожные пробы проводят с полисахаридным антигеном различных видов грибов (Candida albicans, Candida krusei, Candida tropicalis). Пробу ставят по типу реакции Манту (“пуговка на туберкулёз”). Реакцию учитывают через 24 – 48 ч. после проведения пробы. Внутрикожные пробы считают более специфичными при хроническом течении кандидаинфекции. Серологические реакции. Реакция агглютинации при кандидозах считают истинно положительной при разведении сыворотки более высоком, чем 1:100. Реакция связывания комплимента (РСК) с полисахаридными антигенами менее чувствительна, но более специфична по сравнению с реакцией агглютинации. При относительно небольших очагах поражения РСК почти всегда отрицательна.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – относительно новый, но за счёт высокой чувствительности и специфичности весьма перспективный метод. Как ни парадоксально, именно высокая чувствительность ограничивает применение метода ПЦР в диагностике кандидамикозов: результат оказывается положительным даже в присутствии минимальных количеств ДНК гриба при носительстве, которое, как было сказано выше, широко распространено.

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА

Принимая во внимание возможность кандидоносительства, диагноз урогенитального кандидоза устанавливается при наличии клинических проявлений заболевания и микроскопического выявления грибов рода Candida с преобладанием вегетирующих форм (почкование, псевдомицелий). Наиболее достоверным методом лабораторного исследования является культуральный с количественным учетом колоний грибов. Обнаружение грибов при отсутствии симптомов не является показанием к назначению лечения, так как они периодически могут выявляться и у здоровых людей. Почти у 75% женщин в течение жизни наблюдается хотя бы один эпизод урогенитального кандидоза.

При создании сайта использованы материалы, размещенные на интернет странице международного центра репродуктивной медицины (г. Санкт-Петербург, Россия). Выражаем благодарность профессору В. Корсаку за помощь и содействие.

Вопрос задает – Наталья, 29, Иркутск по теме: Гинекология

Умоляю, помогите, я больше не знаю куда обращаться! Очень прошу прочесть.
В 2016 г. была замершая беременность, точнее анэмбриония (предположительно из-за присутствия в крови цитомегаловируса, IgM был положительным). При этом вакуум-аспирация была проведена на 11 неделе беременности, т.е. около 9 недель я ходила с пустым плодным яйцом. В 8 больнице я прошла стандартный курс антибиотикотерапии. Из стационара меня выписали с болями внизу живота и отправили лечиться по месту жительства. Гинеколог из местной поликлиники назначила курс противовоспалительных свечей. Боли внизу живота сохранялись, критические дни так и не наступили. После этого гинеколог назначила мне гормональные препараты для наращивания эндометрия. После появления невыносимых болей, я сделала УЗИ, которое показало воспаление в матке. Дальше началось бесконечное хождение по врачам с жалобами на боль внизу живота, дискомфорт (зуд) во влагалище и наружных половых органов, на патологические выделения.
Мною были сданы множество мазков из влагалища: общие мазки, мазки методом ПЦР Фемофлор Скрин, мазки на бак посев. Все результаты всегда содержали повышенное количество Gardnerella vaginalis, нити Лептотрикса, иногда Eubacterium spp., Streptococcus spp., Staphylococcus haemolyticus, Klebsiella pneumoniae. Так как после нескольких курсов антибиотиков УЗИ воспаление в матке уже не показывало, мне ставили диагноз «хронический бактериальный вагиноз».  
За это время я прошла курсы лечения следующими препаратами:
— вильпрафен таблетки
— клиндамицин таблетки
— далацин крем
— нео-пенотран свечи
— тержинан свечи
— полиженакс свечи
— пимафуцин свечи
Для восстановления микрофлоры влагалища были назначены:
— лактагель
— лактожиналь
— вагилак таблетки
— вагинорм-С свечи
— ацилакт свечи
— генферон свечи    
Мне также было проведена процедура внутривенного лазерного облучения крови и плазмолифтинг во влагалище и шейку матки. Никаких результатов от лечения я не получила, все жалобы сохранились, при этом появились боли в почках и проблемы с мочеиспусканием. Гинекологи развели руками и сказали, что больше ничем помочь мне не могут.
Я сдала бак посев мочи, где был выявлен высокий титр Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae. Далее я начала лечение у урологов. После каждого пройденного курса в анализах продолжала появляться инфекция. Мне были поставлены диагнозы: хронический пиелонефрит, хронический цистит, хронический уретрит. Проводили несколько курсов инстилляций в мочевой пузырь, цистоскопию. За это время я прошла курсы лечения следующими препаратами:
— гентамицин уколы
— таваник (левофлоксацин) таблетки
— панцеф таблетки
— фурамаг таблетки
— палин таблетки
— монурал таблетки
— нолицин таблетки
— нитроксолин таблетки
— уроваксом
— уропрофит
Так как результата от лечения снова не было, мне пришлось снова обращаться в гинекологию. Шерман Е.C. заподозрила оставшееся воспаление в матке — источник (причину) постоянно поступавшей инфекции в мочеполовую сферу. Анализ на бак посев из полости матки выявил Klebsiella + Enterococcus значительный рост нескольких колоний. Исходя из чувствительности к антибиотикам, мне был назначен семидневный курс внутривенных инъекций Тиенама (имипенем). После лечения повторный мазок из полости матки показал высокий титр Enterococcus. Был назначен внутритканевой электрофорез с Амоксиклавом и магнитотерапия.
Лечение не дало результатов, и в следующем бакпосеве из полости матки был выявлен высокий титр Staphylococcus spp. Врачи, в том числе и Шерман Е.С., признают своё бессилие и не могут больше ничего предложить.
В настоящее время у меня остаются желто-зелёные выделения, зуд, боли внизу живота, боли в мочевом пузыре и уретре, мочеиспускание каждые 15 мин.
Мне пришлось бросить семью, уволиться с работы и уехать в Москву за помощью. Я консультировалась с профессорами центра акушерства и гинекологии им. Сеченова. Они сказали, что не могут помочь и признали случай не стандартным. Мне удалось попасть к доктору Адамян из НИИ Центра акушерства и гинекологии им. Кулакова, которая поставила мне диагнозы: хронический эндометрит, аденомиоз, бесплодие. Она впервые назначила мне гистероскопию с выскабливанием и гистологией, а также лапароскопию. Но мне пришлось срочно вернуться в Иркутск. Я очень прошу вас о помощи, помогите мне разобраться с моей ситуацией. У меня есть. маленький ребёнок, которому нужна здоровая мама. Умоляю, помогите!

Клиника «Мать и дитя» Иркутск:

Добрый день!
Запишитесь на консультацию к Михаилу Николаевичу Чертовских.
С собой возьмите имеющиеся консультации, выписки, анализы.

Что такое лептотрикс: причины, симптомы и лечение

Лептотрикс – представляет собой инфекционное расстройство, вызванное микроорганизмами, размножающимися в пресноводных водоёмах (но также могут встречаться и в бассейнах). Исходя из названия (Leptos тонкие + thrix — волосы), становится понятно, что возбудители напоминают длинные волоски. Практически во всех случаях заболевание диагностируется у представительниц женского пола — у мужчин такой недуг встречается крайне редко. Несмотря на то что вирус в организме обитает в ротовой полости, его можно обнаружить также во влагалище. При этом заболевание не передаётся половым путём. Кроме этого, нередко диагностируется у представительниц слабого пола в период беременности.

Не занимайтесь самолечением. При первых признаках заболевания обращайтесь к врачу.

Всего существует несколько разновидностей такой бактерии – лептотрикс, способствующий развитию заболевания во рту, а также представители, вызывающие эту болезнь во влагалище. Причём не во всех случаях может назначаться лечение. Если подобное расстройство не проявляется никакими симптомами, то от терапии можно отказаться. Основной причиной возникновения недуга является попадание бактерии в человеческий организм во время купания в водоёмах или бассейнах. Такая болезнь половым путём не передаётся.

Характерных симптомов лептотрикс ротовой полости не имеет. Немного ярче картина протекания недуга с локализацией во влагалище. В такой ситуации женщина может обнаружить обильные выделения, имеющие неприятный запах и сероватый оттенок. Остальные признаки такого заболевания можно выявить при осмотре у гинеколога.

Выявление лептотрикса в мазке из влагалища не составляет трудностей — бактерии с лёгкостью обнаруживаются под микроскопом. Немного сложнее происходит диагностика подобного заболевания в полости рта, так как оно не доставляет каких-либо неприятных ощущений. Зачастую оно обнаруживается случайно, при осмотре зева. Лечение такого расстройства только медикаментозное.

Главным путём попадания вируса в женский организм является проточная вода, купание в бассейнах или водоёмах. Но существует несколько факторов, при наличии которых в большинстве случаев диагностируется лептотрикс. К ним относятся:

  • использование женщиной ВМС;
  • снижение иммунной системы;
  • широкий спектр заболеваний крови;
  • онкологический процесс;
  • наличие ВИЧ-инфекций.

Такое заболевание диагностируется только у женщин, в частности в период беременности, а для мужчин это расстройство не несёт угрозы.

Лептотрикс – это такое расстройство, которое может протекать абсолютно бессимптомно. При таком недуге с локализацией в полости рта признаки могут, вообще, не выражаться. Исключение составляет та ситуация, когда количество болезнетворных организмов значительно увеличивается. В таких ситуациях возможно возникновение чувства постороннего предмета в зеве, а также наличие серого налёта на языке, небе и миндалинах.

Несколько шире проявление такого заболевания во влагалище. Оно может выражаться такими симптомами, как:

  • выделения серого оттенка, со зловонным запахом;
  • возникновение пятен на слизистой влагалища;
  • приобретение влагалищем жёлтого оттенка.

Последние два признака могут быть обнаружены только во время осмотра у гинеколога.

Несмотря на то что лептотрикс практически никак внешне не проявляется, такое заболевание имеет ряд осложнений. Например, подобное инфицирование ротовой полости может привести к патологиям зубной эмали, размягчению и разрушению зубов. При аналогичном процессе во влагалище, во время изучения мазка, могут быть обнаружены некоторые половые инфекции, например, хламидиоз, трихомониаз и вагинальный кандидоз.

Кроме этого, в последнее время было выявлено негативное влияние лептотрикса на протекание беременности. У женщин, в мазке которых был обнаружен вирус, очень часто происходят самопроизвольные выкидыши, а также присутствуют воспаления в околоплодной жидкости и оболочке плода. После рождения у большого количества малышей, матери которых имеют такой недуг, наблюдаются различные осложнения бактериального характера.

Для мужчин такое заболевание не представляет опасности.

Трудностей в постановке правильного диагноза у опытных специалистов не возникает, поскольку бактерии хорошо видны при микроскопическом изучении — они имеют вид длинных нитей. Но для окончательного подтверждения диагноза могут потребоваться дополнительные диагностические мероприятия. К ним относят:

  • гинекологический осмотр пациентки – даёт возможность обнаружить внутренние симптомы лептотрикса влагалища;
  • изучение зева – может обнаружить большое количество бактерий во рту;
  • бактериальный посев;
  • ПЦР диагностика.

В случаях, когда пациенткой является женщина в период беременности, необходима дополнительная консультация акушера-гинеколога.

Несмотря на достижения мировой медицины, специального лечения лептотрикса, при его обнаружении в мазке из полости рта или влагалища, не существует. Высокую эффективность показывают антибактериальные препараты. Для того чтобы вылечить заболевание в области половых органов, необходим приём антибиотиков. Для женщин в период беременности составляется щадящая тактика терапии. Кроме этого, используются лекарственные вещества, направленные на укрепление иммунитета. Результаты медикаментозного лечения прослеживаются путём микроскопических изучений мазка из влагалища или рта.

Для того чтобы женщина никогда не испытывала проблем с лептотриксом, необходимо придерживаться нескольких правил профилактики. Среди которых:

  • тщательное выполнение правил личной гигиены, в особенности после посещения бассейнов или купания в водоёмах. Постоянно следить за тем, чтобы вода не попадала в рот;
  • употребление только очищенной проточной воды, которая прошла через фильтрацию;
  • посещение гинеколога перед планированием беременности.

Поскольку заболевание может протекать без выражения симптомов, необходимо регулярно проходить осмотры у женского врача — не реже двух раз в год. При своевременном лечении прогноз заболевания благоприятный.

Понимание и лечение вагинального лактобациллеза (leptothrix vaginalis) — My Vagina


Вагинальный лактобактериоз характеризуется избытком более длинных, чем обычно, видов бактерий, связанных с лактобактериями, Leptothrix aginalis .

Лактобациллы обычно имеют длину 5-15 мкм. При лактобактериозе бактерии образуют сегментированные цепочки длиной 40–75 мкм 2 .

Но до сих пор не ясно, что это за бактерии.Идентификация не была проведена должным образом, последовательность ДНК не была взята, и культивирование затруднено.

По мнению некоторых исследователей 3 , около 15 процентов тех, кто жалуется на обильные выделения из влагалища, болеют лактобактериозом.

Было высказано предположение 4 , что некоторые симптомы бактериального вагиноза на самом деле могут быть лактобактериозом, вызываемым L. vaginalis .

Другие микробные находки с

L. vaginalis

В одном исследовании 1 , распространенность L.vaginalis в мазках Папаниколау составила 4% (18 образцов из 445). С L. vaginalis пришло :

  • Воспалительные изменения (16 из 18)
  • Грибки (6 из 18)
  • Атипичные плоскоклеточные клетки неопределенного значения (4 из 18)
  • Наблюдения за другими клетками
  • Другие исследования показали соединение L. vaginalis с Trichomonas vaginalis («спагетти и фрикадельки») 5

Симптомы лактобациллеза

  • Обильные белые выделения
  • Густые, кремовые, возможно творожистые выделения
  • Ощущение ‘ все время мокрый (в нижнем белье)
  • Возможен зуд вульвы
  • Возможное ощущение жжения входа во влагалище (интроитуса) после мочеиспускания
  • Очистка вульвы и перианальной области требуется регулярно
  • Симптомы наиболее заметны во второй половине менструального цикла цикл (постовуляция), особенно непосредственно перед началом менструального цикла
  • Симптомы часто цикличны
  • N o необычный запах
  • pH в пределах нормы
  • Отсутствие других клинических проявлений при вагинальном и цервикальном осмотре
  • Возможно, ранее безуспешно лечили от дрожжевого или другого дисбаланса микрофлоры

Чем лактобациллез отличается от цитолитического вагиноза?

Цитолитический вагиноз (ЦВ) отличается, потому что лактобациллы в ЦВ имеют нормальный размер, и есть другие признаки, такие как остатки эпителиальных клеток.CV также представлен многочисленными промежуточными эпителиальными клетками 6 .

Лактобациллез и вульводиния

Исследователи 7 предположили, что, поскольку лактобактериоз сопровождается повышенным образованием молочной кислоты и перекиси водорода, он может вызывать или способствовать повреждению эпителиальных клеток и нервов, что, возможно, является фактором риска вульводинии.

Лактобациллез и диабет

Другие исследователи обнаружили корреляцию между сахарным диабетом II типа, поскольку у женщин с высоким уровнем глюкозы в сыворотке больше лактобацилл.

Лечение вагинального лактобактериоза

Медикаментозное лечение включает пероральный прием амоксициллина-клавуланата или доксициклина.

  • 500 мг амоксициллина клавуланата перорально каждые восемь часов в течение семи дней
  • 100 мг доксициклина каждые 12 часов в течение 10 дней
  • Вагинальный нифурател
  • Клавуланат калия

Ссылки

  1. 1.

    Meštrović микробиологическое значение отчетов о мазках по Папаниколау. Диагностика Цитопатол . Октябрь 2015: 68-69. DOI: 10.1002 / dc.23385
  2. 2.

    Горовиц Б.Дж., Морд П.А., Надь Э., уровень EL. Вагинальный лактобациллез. Американский журнал акушерства и гинекологии . Март 1994: 857-861. DOI: 10,1016 / s0002-9378 (94) 70298-5
  3. 3.

    Вентолини. Вагинальный лактобациллез. J Clin Gynecol Obstet . 2014. doi: 10.14740 / jcgo278e
  4. 4.

    Фитцхью В.А., Хеллер Д.С. Значение диагностики микроорганизмов на мазке Папаниколау. Журнал болезней нижних отделов половых путей . Январь 2008: 40-51. DOI: 10.1097 / lgt.0b013e31813e07ff
  5. 7.

    Ricci P, Troncoso JL. Лактобактериоз и хроническая вульварная боль: поиск факторов высокого риска как предшественников у женщин, у которых развилась вульводиния. Журнал малоинвазивной гинекологии . Ноябрь 2013 г .: S163-S164. doi: 10.1016 / j.jmig.2013.08.550

Размещено
Последний отзыв 3 сентября 2020 г. здоровья и болезней, базирующаяся в Мельбурне, Австралия.

Джессика является владельцем и ведущим натуропатом My Vagina и является членом:

  • Международного общества по изучению вульвовагинальных заболеваний (ISSVD)
  • Международного общества изучения женского сексуального здоровья (ISSWSH)
  • Национальная ассоциация вульводинии (NVA) Австралия
  • Новозеландское вульвовагинальное общество (ANZVS)
  • Австралийское общество традиционной медицины (ATMS)

Смешанный вагинит — больше, чем коинфекция и имеет терапевтическое значение

Традиционный диагноз вагинита включает симптомы пациента результаты, наблюдаемые при влагалищном осмотре и лабораторном анализе влагалищной жидкости.Целью этого исследования было оценить стандартные методы лабораторной диагностики, выполняемые клиницистами для женщин с аномальными вагинальными симптомами, и сравнить эти результаты с результатами, полученными с помощью теста гибридизации ДНК для Trichomonas vaginalis, Gardnerella vaginalis и Candida. В исследование была включена 501 женщина в возрасте от 14 до 67 лет с симптомами. Были получены три вагинальных образца для тестов с влажным солевым раствором, препаратом гидроксида калия (КОН), запахом амина, pH и гибридизацией нуклеиновых кислот (T vaginalis, G vaginalis и Candida sp).Клиницисты и медицинские техники независимо оценили тесты на влажное крепление, приготовление КОН, амин и pH. Медицинский техник обработал тесты ДНК в соответствии с протоколом производителя. Из 499 пациентов, по которым были доступны полные данные, кандидозный вульвовагинит был диагностирован у 20,0%, вагинальный трихомониаз у 7,4% и бактериальный вагиноз у 52,1%. У четырнадцати процентов испытуемых были множественные вагинальные инфекции. Чувствительность и специфичность микроскопически диагностированных клиницистами вульвовагинального кандидоза, вагинального трихомониаза и бактериального вагиноза составила 39.6% и 90,4%, 75,0% и 96,6% и 76,5% и 70,8% соответственно. Чувствительность и специфичность диагностики с помощью ДНК-зонда для тех же типов вагинита составила 75,0% и 95,7%, 86,5% и 98,5% и 95,4% и 60,7% соответственно. Когда учитывались только женщины с множественными вагинальными инфекциями, процент правильных клинических диагнозов по поводу кандидозного вульвовагинального туберкулеза, вагинального трихомониаза и бактериального вагиноза составил 49,3%, 83,6% и 59,7% соответственно. Для теста ДНК-зонда процент правильных диагнозов составил 72.9%, 92,9% и 90,0% соответственно. Врачи первичной медико-санитарной помощи продемонстрировали высокую специфичность, но низкую чувствительность при выявлении вагинального трихомониаза и вульвовагинального кандидоза микроскопическими методами. Правильная микроскопическая диагностика бактериального вагиноза оказалась для клиницистов еще более сложной задачей, равно как и диагностика множественных вагинальных инфекций. В диагностике вагинальных инфекций клиницисты не были столь точны, как тест ДНК. Клиницистам необходимо больше знаний в области лабораторной диагностики вагинитов.Клиницисты должны тщательно исследовать каждое предметное стекло под микроскопом, систематически исследовать предметное стекло для каждого типа вагинита и рассматривать pH образца и наличие лейкоцитов, бактерий Lactobacillus или запах амина как дополнительные ключи к разгадке инфекции.

В чем разница между дрожжевой инфекцией и бактериальным вагинозом?

Иногда вагинит или воспаление влагалища может быть настолько легким, что вы можете не подумать, что происходит что-то необычное. В других случаях вагинит сопровождается болью и дискомфортом, что может указывать на дрожжевую инфекцию или бактериальный вагиноз.

Проблема? Обе проблемы имеют общие симптомы, из-за чего трудно определить, какой из них вы испытываете.

Рэйчел Уррутия, доктор медицины, акушер-гинеколог в Медицинском центре UNC и доцент Медицинской школы UNC, объясняет разницу между ними и время, когда вам следует обратиться к врачу.

Что такое дрожжевая инфекция?

Грибковая инфекция — это когда дрожжи, естественным образом присутствующие в вашем теле, обычно такого типа, как Candida, бесконтрольно разрастаются и вызывают инфекцию во влагалище и / или вульве.Это может произойти по разным причинам, включая ослабленную иммунную систему, более частый секс или беременность. Некоторые люди, например, страдающие диабетом, также более подвержены дрожжевым инфекциям.

Дрожжевые инфекции не являются инфекциями, передаваемыми половым путем (ИППП), но секс может привести к дрожжевой инфекции, поскольку половой акт может вызвать небольшие разрывы на коже, которые позволяют большему количеству дрожжей расти.

Симптомы дрожжевой инфекции включают густые белые выделения из влагалища, зуд, жжение и покраснение.Секс с дрожжевой инфекцией может быть болезненным, и при мочеиспускании он может причинить боль.

Три из 4 женщин в какой-то момент жизни заболеют дрожжевым грибком, и у большинства из них это заболевание протекает в легкой форме. Однако в некоторых случаях они могут перерасти в более серьезные инфекции.

Что такое бактериальный вагиноз?

Бактериальный вагиноз (БВ) — это бактериальная инфекция влагалища, которая является домом для множества бактерий.

BV вызван дисбалансом этих бактерий. Когда присутствует слишком много бактерий определенного типа, включая штамм gardnerella vaginalis, это может привести к инфекции.БВ не является ИППП, но, поскольку он вызван дисбалансом, секс может привести к БВ из-за изменения pH во влагалище или передачи бактерий.

Симптомы

BV могут быть похожи на симптомы дрожжевой инфекции. Вы можете испытывать зуд, жжение при мочеиспускании и аномальные выделения. В отличие от выделений дрожжевой инфекции, выделения BV могут иметь неприятный запах и обесцвечиваться.

BV является наиболее распространенной формой бактериальной вагинальной инфекции у женщин в возрасте от 15 до 44 лет. Если не лечить, BV может вызвать другие осложнения со здоровьем.

Предотвращение инфекций

Поскольку эти формы вагинита вызваны дисбалансом во влагалище, старайтесь осознавать все, что вы делаете, что может нарушить микробиом в этой части вашего тела. Например, не спринцеваться. Врачи рекомендуют использовать только воду и мыть только внешнюю часть области гениталий, поскольку мыло и дезодоранты могут нарушить баланс дрожжей и бактерий. Если вы думаете, что ваши инфекции могут быть связаны с сексом, поговорите со своим врачом.

Доктор.Уррутия говорит, что лучшее, что вы можете сделать для здоровья влагалища, — это регулярно обращать внимание на то, что происходит «там внизу». На протяжении всего менструального цикла тело подсказывает, что происходит внутри. Определенные этапы цикла могут вызвать сухость или выделения. Знание того, что является нормальным для вашего тела, может помочь вам определить, есть ли у вас инфекция или вы просто вступаете в другую стадию своего цикла.

Также зуд и ненормальные выделения являются симптомами некоторых ИППП.Если вы думаете, что могли заразиться ИППП, пройдите тестирование. Доктор Уррутия говорит, что можно одновременно заразиться ИППП и дрожжевой инфекцией или БВ.

Когда идти к врачу

Поскольку дрожжевые инфекции и BV имеют такие схожие симптомы, может быть трудно сказать, что вы испытываете, а самодиагностика часто бывает неточной, — говорит доктор Уррутия.

Доктор Уррутия рекомендует несколько дней понаблюдать за своими симптомами, прежде чем предпринимать какие-либо действия. Это гарантирует, что вы не просто проходите нормальную часть менструального цикла.

Если вы считаете, что у вас может быть дрожжевая инфекция, доктор Уррутия говорит, что можно попробовать безрецептурные противогрибковые препараты, прежде чем записываться на прием к врачу — при условии, что лекарство длится дольше одного дня. лечение.

«Не используйте однодневные процедуры, потому что они не так эффективны, как более длительные», — говорит она. «Вы должны хотя бы использовать трехдневное лечение».

Для исчезновения симптомов дрожжевой инфекции может потребоваться до полутора недель, но вы должны увидеть некоторое улучшение в течение недели.- говорит Уррутия. Если симптомы не улучшаются, пора обратиться к врачу.

В отличие от дрожжевых инфекций, вы не можете принимать безрецептурные лекарства от BV. Если вы считаете, что у вас может быть бактериальный вагиноз, поговорите со своим врачом, который назначит вам соответствующее лекарство.

Средства для лечения дрожжевых инфекций и BV

Врачи обычно диагностируют вагинальные инфекции, беря ваш анамнез и проверяя мазок из влагалища.

Как уже упоминалось, дрожжевые инфекции можно лечить безрецептурными противогрибковыми препаратами, которые бывают разных форм, включая таблетки, кремы и суппозитории, которые вводятся во влагалище.Ваш врач может также назначить пероральные противогрибковые препараты.

BV лечится антибиотиками, которые отпускаются только по рецепту. Вы должны увидеть улучшение своих симптомов в течение дня или двух после начала лечения.

В любом случае, если ваши симптомы не улучшаются в течение недели после начала приема лекарств, обратитесь к врачу, так как ему или ей, возможно, придется пересмотреть диагноз или попробовать другое лечение.


Если вы подозреваете, что дрожжевая инфекция не проходит быстро или BV, поговорите со своим лечащим врачом или акушером-гинекологом.Если вы хотите записаться на прием к акушеру-гинекологу, вы можете найти его здесь.

Сравнение тестов Affirm VPIII и Папаниколау при обнаружении инфекционного вагинита | Американский журнал клинической патологии

Аннотация

Для сравнения молекулярного теста Affirm VPIII (Becton Dickinson, Burlington, NC) с морфологической идентификацией, используемой в рутинном скрининге теста Папаниколау (Пап) при обнаружении и идентификации видов Candida , Trichomonas vaginalis и Gardnerella vaginalis , мы идентифицировали 431 случай с сопутствующим тестом Папаниколау и тестом Affirm VPIII, выполненным из архивов крупного академического учреждения.В исследуемую популяцию вошли женщины в возрасте от 17 до 79 лет (средний и средний возраст 33 и 31 год, соответственно). При обычном мазке Папаниколау у 60 пациентов (13,9%) был обнаружен бактериальный вагиноз, у 60 (13,9%) — кандидоз и у 3 (0,7%) — инфекция Trichomonas . С помощью анализа Affirm VPIII 183 (42,5%) пациентки дали положительный результат на G vaginalis , 70 (16,2%) положительный результат на видов Candida и 10 (2,3%) положительных на T vaginalis. Различия статистически значимы.Результаты показывают, что у нашей популяции пациентов была высокая частота бактериального вагиноза / Candida вагинита; однако Affirm VPIII был более чувствительным диагностическим тестом для обнаружения и идентификации всех 3 микроорганизмов по сравнению с тестом Папаниколау.

Инфекционный вагинит — одна из самых распространенных проблем со здоровьем женщин в Соединенных Штатах. 1 Тремя ведущими микробными агентами, вызывающими 90% инфекционных вагинитов, являются микроорганизмы, вызывающие бактериальный вагиноз (БВ), видов Candida и Trichomonas vaginalis. 2 Хотя БВ характеризуется смешанной инфекцией анаэробных бактерий, Gardnerella vaginalis считается одной из основных бактерий, вызывающих эту инфекцию. 3 Оптимальное лечение зависит от правильной идентификации этих организмов.

Клиническая диагностика инфекционного вагинита основывается на физикальном осмотре и ряде тестов, таких как микроскопическое исследование, определение pH влагалищной жидкости и испытание запаха амина гидроксидом калия (КОН), проводимое по месту оказания медицинской помощи.Однако такие тесты часто требуют много времени и в некоторой степени субъективны. Папаниколау (Пап-тест) стал рутинной процедурой для женщин при их ежегодном гинекологическом посещении из-за его успеха в профилактике рака шейки матки и предшествующих ему поражений. Помимо основного преимущества в качестве скринингового теста на рак, другие преимущества мазка Папаниколау включают обнаружение цервиковагинальных микроорганизмов. Однако использование Пап-тестов для диагностики инфекционного вагинита остается спорным. 4,5

Недавно был разработан молекулярный тест Affirm VPIII assay (Becton Dickinson, Burlington, NC) для обнаружения и специфической идентификации видов Candida , G vaginalis и T vaginalis из образцов влагалищной жидкости. в продаже.Предварительные результаты обнадеживают. 6–9 Целью этого исследования было сравнение молекулярного теста Affirm VPIII с морфологической идентификацией, используемой в рутинном скрининге мазка Папаниколау при обнаружении и идентификации этих 3 микроорганизмов.

Материалы и методы

Пациенты, которые прошли мазок Папаниколау и сопутствующее молекулярное тестирование Affirm VPIII в период с августа 2008 г. по март 2009 г., были включены в это утвержденное учреждением исследование. Пациенты, которые прошли молекулярное тестирование Affirm VPIII без Пап-теста, были исключены из исследования.Образцы были предоставлены десятком местных гинекологов.

Все мазки Папаниколау были жидкими препаратами; 20% — ThinPrep (Hologic, Marlboro, MA), а остальные 80% — SurePath (Becton Dickinson). Пап-тесты изначально не были идентифицированы как часть исследования, потому что цитотехнологи и цитопатологи были не осведомлены о результатах молекулярного тестирования. Диагноз BV был поставлен на основании следующих трех результатов: пленочный фон из мелких коккобацилл, отдельные плоские клетки, покрытые слоем коккобацилл вдоль клеточных мембран (так называемые ключевые клетки), и заметное отсутствие лактобацилл . 10 Изображение 1.Диагноз инфекции Candida был поставлен путем идентификации дрожжей и псевдогифов Изображение 2, тогда как диагноз инфекции Trichomonas был поставлен путем идентификации грушевидных структур размером 15–30 мкм с центрально расположенным ядром. 3.

Образцы для молекулярного теста Affirm VPIII были собраны из заднего свода и боковых стенок влагалища с помощью стерильного тампона. Затем мазок помещали в среду для инактивации, предоставленную продавцом (Becton Dickinson).Среда предназначена для сохранения нуклеиновой кислоты микроорганизмов во время транспортировки образцов при комнатной температуре до 72 часов.

Image 1

Отдельные плоские клетки, покрытые слоем коккобацилл вдоль клеточных мембран (так называемые ключевые клетки), и заметное отсутствие лактобацилл, характерных для бактериального вагиноза (Папаниколау, × 400).

Image 1

Отдельные плоские клетки, покрытые слоем коккобацилл вдоль клеточных мембран (так называемые ключевые клетки) и заметное отсутствие лактобацилл, характерных для бактериального вагиноза (Папаниколау, × 400).

Image 2

Псевдогифы, характерные для видов Candida , образованные удлиненными почкующимися гифами с перетяжками по длине (Папаниколау, × 400).

Image 2

Псевдогифы, характерные для видов Candida , образованные удлиненными почкующимися гифами с перетяжками по длине (Папаниколау, × 400).

Затем мазки тестировали с помощью анализа Affirm VPIII на процессоре BD MicroProbe (Becton Dickinson) в соответствии с рекомендациями производителя.Тест основан на принципе гибридизации нуклеиновых кислот, при котором комплементарные цепи нуклеиновых кислот выравниваются с образованием специфических двухцепочечных комплексов, называемых гибридами. В системе используются 2 отдельных одноцепочечных зонда, которые комплементарны уникальным генетическим последовательностям каждого организма-мишени, зонд захвата и зонд проявления цвета. Зонд для улавливания иммобилизуют на шарике, встроенном в карту анализа зонда (Becton Dickinson). Карта анализа зонда содержит отдельные шарики для каждого целевого организма.Зонды проявления цвета содержатся в кассете с реагентами с несколькими лунками.

Анализ состоит из следующих 3 этапов: денатурация образцов для высвобождения генетически уникальных нуклеиновых кислот каждого организма-мишени, автоматизированная обработка анализа и запись результатов через 30 минут. Анализ включает в себя положительный и отрицательный контроли на каждой карте анализа зонда, которые тестируются одновременно с каждым образцом пациента. После завершения молекулярного тестирования результаты анализа Affirm VPIII визуально наблюдались и записывались на Изображение 4.

Пап-тесты с результатами, которые отличались от результатов теста Affirm VPIII, были вручную повторно проверены цитотехнологом, который не знал результатов первоначальной интерпретации Пап-теста и результатов молекулярных тестов. Статистический анализ проводился с использованием критерия χ 2 и точного критерия Фишера. Статистическая значимость была установлена ​​на уровне 0,05 или ниже. Мы использовали статистику κ для оценки согласованности с поправкой на случайность между тестом Папаниколау и тестом Affirm VPIII.Значение κ, равное 0, указывает на то, что наблюдаемое совпадение такое же, как ожидалось случайно, тогда как значение κ, равное 1, указывает на полное совпадение. Значения от 0 до 1 представляют различные степени согласия следующим образом: значение менее 0,2 указывает на плохое согласие; От 0,21 до 0,6, согласие от умеренного до умеренного; От 0,61 до 0,8, хорошее совпадение; и от 0,81 до 1,0, отличное совпадение. 11

Изображение 3

Trichomonas vaginalis (Папаниколау, × 400).Грушевидные структуры размером 15–30 мкм с центральным ядром и эозинофильными цитоплазматическими гранулами. Leptothrix можно увидеть в ассоциации с трихомонадами.

Изображение 3

Trichomonas vaginalis (Papanicolaou, × 400). Грушевидные структуры размером 15–30 мкм с центральным ядром и эозинофильными цитоплазматическими гранулами. Leptothrix можно увидеть в ассоциации с трихомонадами.

Результаты

В исследование включен 431 случай.Возраст участников колебался от 17 до 79 лет, в среднем 33 года. С помощью мазка Папаниколау у 60 пациентов (13,9%) был обнаружен БВ, у 60 (13,9%) был кандидоз и у 3 (0,7%) была инфекция Trichomonas . С помощью анализа Affirm VPIII 183 (42,5%) случая дали положительный результат на G vaginalis , 70 (16,2%) были положительными на видов Candida и 10 (2,3%) были положительными на T vaginalis. Различия статистически значимы.

Диагноз Candida , диагностированный с помощью мазка Папаниколау, хорошо согласуется с результатом теста Affirm VPIII (κ = 0.66). Было плохое совпадение диагноза BV (κ = 0,32) и инфекции Trichomonas (κ = 0,30).

Коинфекция двумя организмами была отмечена в 30 случаях с помощью теста Affirm VPIII; 26 случаев дали положительный результат на Gardnerella и Candida , а остальные 4 случая были положительными на Gardnerella и Trichomonas. Один случай был положительным для всех 3 организмов с помощью анализа Affirm VPIII. Коинфекция двумя или более организмами была отмечена только в 5 случаях на основе оценки мазка Папаниколау.Из 5 случаев у 4 был BV и кандидоз, а у 1 — кандидоз и инфекция Trichomonas . При помощи мазка Папаниколау не было обнаружено ни одного случая наличия всех трех микроорганизмов.

Image 4

Подтвердите карту анализа зонда VPIII для 2 образцов пациентов. Карта анализа зонда вверху визуально интерпретируется как положительная для Candida ; карта анализа зонда внизу положительна для Gardnerella. Каждая карта датчика включает положительный и отрицательный контроли для каждого образца пациента.

Изображение 4

Подтвердите карту анализа зонда VPIII для 2 образцов пациентов. Карта анализа зонда вверху визуально интерпретируется как положительная для Candida ; карта анализа зонда внизу положительна для Gardnerella. Каждая карта датчика включает положительный и отрицательный контроли для каждого образца пациента.

Из 431 случая с результатами теста Pap и Affirm VPIII, 154 имели противоречивые результаты цитологических и молекулярных тестов в отношении обнаружения и идентификации 1 или более из 3 микроорганизмов.Среди этих 154 несоответствующих случаев 136 имели положительный результат молекулярного теста, но отрицательный цитологический результат. Среди последних в рамках программы Affirm VPIII было выявлено 127 случаев инфицирования Gardnerella , 25 случаев кандидоза и 7 случаев трихомониаза. При повторном скрининге мазков Папаниколау BV был выявлен в 41 случае, кандидоз — в 8 и трихомониаз — в 3, которые были пропущены при первоначальном цитологическом скрининге.

Было 18 случаев, в которых мазки Папаниколау выявили присутствие микроорганизмов, в том числе 13 случаев Candida , 4 случая BV и 1 случай Trichomonas , но соответствующие результаты молекулярного теста были отрицательными.При повторном скрининге с помощью Пап-тестов было подтверждено 8 случаев кандидоза и 2 случая БВ. Случай отрицательного результата молекулярного тестирования на трихомониаз не был подтвержден повторным скринингом; слайд продемонстрировал обширный цитолиз с множеством обнаженных ядер, которые можно было ошибочно принять за трихомонады. Пап-тесты, которые были «чрезмерно интерпретированы» для BV, продемонстрировали пленчатый фон из кокков, но не содержали доказательств наличия ключевых клеток.

Обсуждение

Инфекционный вагинит — частая проблема со здоровьем у женщин. 1 Организмы, вызывающие BV, грибы (кандидоз) и паразиты ( T vaginalis ), являются тремя ведущими микробными агентами, которые вызывают 90% всех инфекционных вагинитов. Сообщается, что три четверти взрослых женщин испытают по крайней мере 1 эпизод вагинального кандидоза в течение своей жизни, а около половины женщин будут иметь 2 или более эпизода. 12 Хотя заболеваемость трихомонадой снижается в течение последних 20 лет, более чем на 7.Каждый год в Соединенных Штатах регистрируется 5 миллионов новых случаев инфекции Trichomonas . 13 BV встречается у 30% населения и чаще встречается у афроамериканцев, чем у европеоидов, в 3 раза. 14 Хотя пораженные пациенты часто обеспокоены тревожными симптомами, существуют также значительные заболевания, связанные с инфекционными заболеваниями. вагинит. Например, пациенты с БВ имеют повышенный риск развития послеоперационной инфекции после операции на органах малого таза. 14 BV и трихомониаз были связаны с неблагоприятными исходами беременности, такими как преждевременный разрыв плодных оболочек, преждевременные роды и низкий вес при рождении. 12

Уровень ошибок при диагностике инфекционного вагинита традиционными методами достаточно высок. На основании клинических признаков и симптомов, а также прикроватного тестирования, включая микроскопию влажного препарата, тест на запах амина KOH и тест pH влагалищной жидкости, около двух третей случаев Candida и BV были неправильно диагностированы врачами общей практики и гинекологами в когорте. 220 женщин с вагинальными жалобами. 7 Авторы объясняют частоту ошибок отсутствием навыков, связанных с микроскопией, и субъективностью некоторых диагностических критериев. Другие факторы, которые, как было отмечено, способствовали ошибочному диагнозу, включали менструацию, спринцевание и самолечение. Более того, инфекционный вагинит может протекать бессимптомно до 50% случаев. 15 В другом исследовании Lowe et al, 16 , точность клинического диагноза BV, Candida vaginitis и T vaginalis сравнивалась с молекулярным тестом ДНК-зонда Affirm VPIII для G vaginalis , T vaginalis и Candida видов.Lowe et al. 16 обнаружили, что по сравнению со стандартом ДНК-зонда, использующим Affirm VPIII, клиническая диагностика чувствительна на 81–85% и специфична на 70–99% для BV, вагинита Candida и трихомониаза. Несмотря на использование традиционных стандартизированных протоколов клинической диагностики даже в самых благоприятных обстоятельствах, диагностика и лечение этих распространенных вагинальных проблем остается сложной задачей. 16

Некоторые авторы рекомендуют использовать окраску по Граму при диагностике БВ. 3 Однако диагноз окрашивания по Граму варьировал от 60% до 90% по сравнению с клиническим диагнозом BV. 17–19 Микробный посев — еще один метод, который может быть полезен при диагностике вагинита и вагиноза. Культура на Trichomonas очень эффективна и относительно недорога. 19,20 Однако ему не хватает клинической применимости, потому что для него требуется специальная среда (алмаз), которая не всегда доступна, и увеличенное время обработки до 5 дней.Культивирование видов Gardnerella и Candida не рекомендуется, поскольку оба микроорганизма могут быть частью нормальной микрофлоры влагалища, не вызывая никаких инфекций. 15,17,19

Благодаря успеху в снижении заболеваемости и смертности от плоскоклеточного рака шейки матки, мазки Папаниколау получили широкое распространение в США и других развитых странах. Одно из второстепенных преимуществ — обнаружение микроорганизмов. В результате многие клиницисты стали полагаться на идентификацию микроорганизмов с помощью рутинного мазка Папаниколау как часть ведения своих пациентов. 5 Чувствительность мазков Папаниколау для диагностики БВ варьируется от 90% до 43%; широкий диапазон результатов отражает использование различных морфологических критериев и то, были ли образцы взяты из шейки матки или из влагалища. 5,21–25 Точно так же тест Папаниколау недостаточно чувствителен в качестве скринингового теста на трихомонад. Более того, в популяциях с низкой распространенностью Trichomonas , обнаруженные с помощью цитоморфологического обзора и зарегистрированные с помощью стандартного Пап-теста, часто давали ложноположительный результат. 3

Увеличилось использование систем визуализации для первичного скрининга Пап-тестов. Для небольшой части отсканированных слайдов не будет выполняться ручная проверка (если в полях, выбранных системой), не будет замечено никаких отклонений, или будет проверяться только ограниченное количество полей (если система ранжирует слайды с низкой вероятностью содержащие отклонения) в зависимости от типа используемой системы визуализации. Это может привести к недостаточному выявлению инфекций.Одно исследование показало, что частота обнаружения Candida (68% против 77%), Trichomonas (80% против 85%) и изменение бактериальной флоры (63% против 65%) были ниже при использовании системы визуализации AutoPap ( Бектон Дикинсон) по сравнению с ручным скринингом. 26

Для решения этих проблем необходим быстрый и чувствительный инструмент. Анализ Affirm VPIII позволяет одновременно обнаруживать наличие клинически значимых уровней Trichomonas, Gardnerella и Candida из вагинальных образцов.Результаты нашего исследования показывают, что анализ Affirm VPIII продемонстрировал значительно более высокие уровни обнаружения для всех 3 организмов по сравнению с тестами Папаниколау. Разница в частоте обнаружения Gardnerella между тестом Affirm VPIII и тестом Папаниколау была наиболее выраженной. Одно правдоподобное объяснение состоит в том, что мазок Папаниколау — это, по сути, образец из шейки матки, в то время как БВ — это, по сути, вагинальное состояние. Следовательно, BV с большей вероятностью будет лучше представлен вагинальными образцами, используемыми в анализе Affirm VPIII. 27 Мы также наблюдали плохое согласие между тестом Affirm VPIII и тестом Папаниколау при идентификации трихомонад. Как упоминалось ранее, в таких популяциях, как наша, с низкой распространенностью Trichomonas , более высокая частота ложноотрицательных и ложноположительных результатов может быть отмечена в отчетах гинекологического цитологического персонала о Trichomonas . 3 Таким образом, наши результаты показывают, что анализ Affirm VPIII более чувствителен, чем мазок Папаниколау, как диагностический инструмент для обнаружения и идентификации инфекционного вагинита.Этот аргумент подтвердил результаты повторного скрининга слайдов Папаниколау с несовпадающими результатами цитологических и молекулярных тестов. Микроорганизмы были идентифицированы при повторном скрининге примерно в одной трети цитологических образцов, которые изначально были отрицательными на микроорганизмы, но имели положительные результаты молекулярных тестов.

Наше наблюдение сопоставимо с результатами исследований, в которых анализ Affirm VPIII сравнивался с другими методами обнаружения этих трех организмов. 6–9,28,29 Основываясь на когорте из 425 женщин, Brown et al. 6 продемонстрировали, что анализ Affirm VPIII был значительно более чувствителен, чем мокрый метод определения Candida (11% против 7%) и . Gardnerella (45% против 14%).Анализ Affirm VPIII также выявил больше случаев инфекции Trichomonas по сравнению с мокрым способом (7% против 5%), но разница не была статистически значимой. 6 Также сообщалось, что анализ Affirm VPIII хорошо коррелировал с окрашиванием по Граму при диагностике BV и кандидоза. 9,28,29

Поскольку виды Gardnerella и Candida могут существовать как нормальная флора у 50% женщин, «слишком чувствительный» молекулярный диагностический тест может дать ложноположительные результаты, что приведет к ненужному лечению. 3,30 Чтобы свести к минимуму возможность ложноположительных случаев из-за микробной колонизации, пороги обнаружения теста Affirm VPIII для каждого организма устанавливаются выше уровней нормальной флоры, что гарантирует обнаружение только клинически значимых случаев. По данным производителя, пороги обнаружения для видов Gardnerella, Candida и Trichomonas составляют 2 × 10 5 колониеобразующих единиц (КОЕ) / мл, 1 × 10 4 КОЕ / мл и 5 × 10 3 КОЕ / мл соответственно. 31 Это может объяснить некоторые из наших «ложноотрицательных» результатов молекулярных тестов, несмотря на «положительный» цитологический результат. Основываясь на личном общении с клиницистами, наши клиенты в целом используют молекулярный тест Affirm VPIII, когда есть клинический симптом, о котором сообщает пациент, и / или клинический признак, отмеченный во время гинекологического осмотра. В зависимости от поставщика, в некоторых случаях, прежде чем заказывать молекулярный тест, в офисе могут быть подготовлены другие диагностические инструменты для вагиноза и вагинита, такие как влажное крепление, хотя это гораздо реже, учитывая временные ограничения офисной практики и снижение навыков. наборы.Если тесты у постели больного интерпретируются как отрицательные, то назначается тест Affirm VPIII. В качестве общего протокола лечения, применяемого нашими клиентами, пациентами с клиническими симптомами и / или признаками вагинита или вагиноза при положительном результате для данного организма (организмов) (включая результат молекулярного теста Affirm VPIII, влажный микроскоп результат обследования и / или положительный результат мазка Папаниколау) предлагается лечение для данного обнаруженного (ых) организма (ов). Использование результатов молекулярного теста Affirm VPIII в дополнение к обычному мазку Папаниколау в случаях, когда есть клиническое подозрение на вагинит или вагиноз, может снизить вероятность потенциальных ложноположительных результатов и ненужного лечения.

Около 14% больных инфекционным вагинитом имеют смешанную инфекцию. 32 В нашем исследовании анализ Affirm VPIII выявил 30 пациентов (7,0%) с коинфекцией 2 или более микроорганизмами, тогда как тест Папаниколау выявил только 5 пациентов (1,2%) с коинфекцией 2 микроорганизмами. Разница была статистически значимой (точный критерий Фишера). Кроме того, цитологический повторный скрининг выявил только 1 дополнительный случай коинфекции 2 патогенами в категории «положительный результат на Trichomonas и Gardnerella ».Наши результаты показывают, что анализ Affirm VPIII превосходит тест Папаниколау в обнаружении нескольких патогенов.

Есть и другие преимущества теста Affirm VPIII перед тестом Папаниколау, в том числе объективность анализа, устранение необходимости в специальных навыках микроскопии и быстрое время обработки менее 2 часов. Кроме того, на анализ не влияют лекарственные препараты, лубриканты, спринцевание или менструация. Среда для транспортировки образцов сохраняет образцы до 72 часов с момента взятия при комнатной температуре, что облегчает транспортировку из кабинета врача в лабораторию. 6

Одним из ограничений нашего исследования является то, что мы не могли оценить чувствительность и специфичность теста Affirm VPIII и Пап-тестов, потому что мы не сравнивали наши результаты с «золотыми стандартами», такими как микробные культуры или Окраска по Граму. В других исследованиях сообщалось, что чувствительность и специфичность анализа Affirm VPIII при идентификации G vaginalis варьировались от 88% до 90% и от 96% до 97%, соответственно. 28,29 Для диагностики видов Candida с использованием анализа Affirm VPIII Петриккос и др. 9 сообщили о чувствительности 82% и специфичности 100% по сравнению с исследованием с использованием 10% КОН.

Мы продемонстрировали, что анализ Affirm VPIII с использованием метода гибридизации ДНК был более чувствительным при идентификации G vaginalis, видов Candida и T vaginalis , чем тест Папаниколау. Кроме того, смешанную инфекцию легче диагностировать с помощью теста Affirm VPIII, чем теста Папаниколау.

CME / SAM

По завершении этого упражнения вы сможете:

  • описывать тест Affirm VPIII на инфекционный вагинит.

  • перечислены преаналитические требования для оптимального выполнения теста Affirm VPIII на инфекционный вагинит.

  • Краткое изложение микробиологии и патологии инфекционного вагинита.

ASCP аккредитован Советом по аккредитации непрерывного медицинского образования для обеспечения непрерывного медицинского образования врачей. ASCP назначает эту образовательную деятельность максимум на 1 баллов AMA PRA категории 1 ™ за статью. Это мероприятие квалифицируется как модуль самооценки Американского совета по патологии, поддерживающий сертификацию, часть II.

Авторы этой статьи, члены и сотрудники комитета по планированию не имеют финансовых отношений с коммерческими интересами, о которых следует раскрывать.

Вопросы появляются на стр. 479. Экзамен находится на сайте www.ascp.org/ajcpcme.

Список литературы

1.

.

Эпидемиология вагинитов

.

Am J Obstet Gynecol

.

1991

;

165

(

4 пт 2

):

1168

1176

,2.

.

Вагинит у взрослых

.

Clin Obstet Gynecol

.

1981

;

24

:

407

438

.3.

.

Новый слайд-тест латексной агглютинации для диагностики острого Candida вагинита

.

Ам Дж. Клин Патол

.

1990

;

94

:

323

325

.4.

и другие.

Точность цитологического исследования шейки матки / влагалища в диагностике бактериального вагиноза

.

Секс-трансмиссия

.

1998

;

25

:

24

27

.5.

и другие.

Выявление бактериального вагиноза во влажных мазках, мазках из влагалища, окрашенных по Папаниколау, и в мазках, окрашенных по Граму

.

Acta Obstet Gynecol Scand

.

1995

;

74

:

67

70

,6.

и другие.

Клиническая оценка Affirm VPIII в обнаружении и идентификации видов Trichomonas vaginalis, Gardnerella vaginalis и Candida при вагините / вагинозе

.

Infect Dis Obstet Gynecol

.

2004

;

12

:

17

21

.7.

и другие.

Играете в кости для диагностики вагинальных жалоб?

Энн Клин Микробиол Антимикроб

.

2006

;

5

:

4

. DOI: .8.

и другие.

Клиническая оценка Affirm VP III в обнаружении и идентификации бактериального вагиноза [письмо]

.

Дж. Chemother

.

2008

;

20

:

764

765

.9.

.

Подтвердите VP III в обнаружении и идентификации видов Candida при вагините

.

Int J Gynaecol Obstet

.

2007

;

96

:

39

40

.10.

и другие.

Неопухолевые исследования

. В:, ред.

Система отчетов Bethesda по цитологии шейки матки

.2-е изд.

Нью-Йорк, Нью-Йорк

:

Springer

;

2004

:

21

56

.11.

.

Статистические методы оценки соответствия между двумя методами клинических измерений

.

Ланцет

.

1986

;

1

:

307

310

.12.

.

Руководство по лечению болезней, передающихся половым путем, 2006 г.

.

MMWR Recomm Rep

.

2006

;

55

(

RR-11

):

1

94

.14.

.

Бактериальный вагиноз: обзор за 2009 год

.

Rev Obstet Gynecol

.

2009

;

2

:

28

37

.15.

.

Оценка и лечение вагинита

.

J Gen Intern Med

.

1998

;

13

:

335

346

. 16.

.

Точность клинического диагноза вагинита по сравнению с лабораторным стандартом ДНК-зонда

.

Акушерский гинекол

.

2009

;

113

:

89

95

. 17.

.

Сравнение методов диагностики бактериального вагиноза у беременных

.

Дж. Клин Микробиол

.

1989

;

27

:

1266

1271

. 18.

и другие.

Диагностика и клинические проявления бактериального вагиноза

.

Am J Obstet Gynecol

.

1988

;

158

:

819

828

. 19.

.

Диагностика бактериального вагиноза методом прямого окрашивания по Граму вагинальной жидкости

.

Дж. Клин Микробиол

.

1983

;

18

:

170

177

.20.

.

Trichomonas vaginalis : переоценка клинических проявлений и лабораторный диагноз

.

J Заразить Dis

.

1980

;

141

:

137

143

. 21.

и другие.

Цитолог и бактериоз влагалищно-эктоцервикальной области: подсказки, запятые и путаница

.

Acta Cytol

.

1989

;

33

:

287

297

. 22.

и другие.

Корреляция между результатами цитологического исследования шейки матки и окраской по Граму в качестве диагностических тестов для бактериального вагиноза

.

Am J Obstet Gynecol

.

1997

;

177

:

532

535

. 23.

.

Диагностическая микробиология бактериального вагиноза

.

Am J Obstet Gynecol

.

1993

;

169

(

2 пт 2

):

455

459

. 24.

и другие.

Бактериальный вагиноз: сравнение результатов мазка Папаниколау и микробиологического исследования

.

Мод Pathol

.

2004

;

17

:

857

860

. 25.

и другие.

Валидация использования мазков из влагалища, окрашенных Папаниколау, для диагностики бактериального вагиноза

.

АПМИС

.

2007

;

115

:

809

813

. 26.

и другие.

Система AutoPap для обнаружения инфекций и доброкачественных клеточных изменений: результаты первичных скрининговых клинических испытаний

.

Диагностика Цитопатол

.

1999

;

21

:

355

358

. 27.

и другие.

Мазок Папаниколау для выявления бактериального вагиноза

.

Int J Gynaecol Obstet

.

2007

;

98

:

20

23

. 28.

и другие.

Тест гибридизации ДНК: инструмент быстрой диагностики для исключения бактериального вагиноза у беременных с симптомами, указывающими на инфекцию

.

Дж. Клин Микробиол

.

2002

;

40

:

3057

3059

. 29.

и другие.

Использование теста гибридизации ДНК для диагностики бактериального вагиноза у женщин с симптомами, указывающими на инфекцию

.

АПМИС

.

2006

;

114

:

784

787

. 30.

.

Надежность диагностики бактериального вагиноза повышена за счет стандартизированного метода интерпретации окраски по Граму

.

Дж. Клин Микробиол

.

1991

;

29

:

297

301

. 31.

Affirm VP III Assay [вкладыш в упаковке]

.

Берлингтон, Северная Каролина

:

Бектон Дикинсон

;

2009

.32.

и другие.

Офисная лабораторная диагностика вагинита: тесты, выполненные врачом, по сравнению с тестом быстрой гибридизации нуклеиновых кислот

.

J Fam Pract

.

1995

;

41

:

575

581

.

© Американское общество клинической патологии

Симптоматическая оценка пациента с ИППП до и после лечения, получающего синдромное лечение — IJOGR

Симптоматическая оценка до и после лечения пациента с ИППП, получающего синдромное лечение

Полный текст PDF



Тип статьи: Оригинал артикула

Сведения об авторе: Хеманта Кумар Прадхан, Пратибха Сингх, Гарима Ядав, Минакши Готвал

Объем: 5

Выпуск: 2

Интернет ISSN: 2394-2754

Печатный ISSN: 2394-2746

Статья Первая страница: 203

Конец статьи: 208


Абстракция

Введение: Целью данного исследования является доступ к использованию синдромного подхода к лечению инфекций, передаваемых половым путем (ИППП) в северо-западной части Индии, а также выработка рекомендаций о сильных и слабых сторонах алгоритмов синдромного управления, а также определить, подтверждают ли доказательства его дальнейшее использование.
Материалы и методы: Всего 412 пациентов, которым был поставлен диагноз ИППП на основании клинического и физикального обследования, лечились на основе синдромального подхода, и, наконец, в исследование было включено 240 пациентов. Диагноз был поставлен на основании признаков, симптомов и обследования. Каждый пациент с симптомами, предполагающим ИППП, лечился на основе алгоритмов синдромного подхода, и пациенты снова наблюдались после завершения лечения для оценки клинического улучшения / ухудшения признаков и симптомов.
Результаты: Выделения из влагалища (48,5%, 194 из 400) с последующей болью внизу живота (46,75%, 187 из 400) были наиболее частыми жалобами. При цитологическом исследовании мазка из шейки матки и влагалища 31,70%, 12,19% и 4,87% дали положительный результат на бактериальный вагиноз, лептотрикс и кандидоз соответственно. Синдромный подход к пациентам с ИППП с симптомами боли в животе, белых выделений P / V и зуда P / V является статистически высоко значимым (значение хи-квадрат ~ 86,44 и его значение p 0,05).
Заключение: Синдромное лечение может быть эффективным методом клинического лечения симптоматических ИППП в условиях ограниченных ресурсов, как показано в наших результатах.Но необходимы дальнейшие исследования для определения соотношения затрат и выгод от внедрения лабораторного скрининга в комплексную программу общественного здравоохранения для борьбы с часто встречающимися ИППП среди населения, подверженного риску ИППП.

Ключевое слово: Диагностика, лабораторные исследования, инфекции, передаваемые половым путем (ИППП), синдромный подход, лечение, Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ).

Doi №: -10.18231 / 2394-2754.2018.0046

Характеристика микробиоты в жидкости эндометрия и вагинальных выделениях у бесплодных женщин с повторной неудачной имплантацией

Исследования показывают, что сохраняющиеся внутриутробные бактериальные инфекционные состояния, такие как хронический эндометрит, потенциально ухудшают процесс имплантации эмбриона.Однако микробная среда в женских половых путях остается в значительной степени неопределенной у бесплодных пациентов с историей повторной неудачной имплантации (RIF). Используя секвенирование следующего поколения, мы стремились охарактеризовать микробиоту в жидкости эндометрия (EF) и вагинальном секрете (VS) у женщин с RIF. В исследование были включены 28 бесплодных женщин с историей RIF и восемнадцать бесплодных женщин, перенесших первую попытку оплодотворения in vitro-переноса эмбриона (контрольная группа).На 6-8 дни лютеиновой фазы естественного цикла, цикла захвата ооцитов или заместительного гормона, парные образцы EF и VS были получены отдельно. Извлеченную геномную ДНК пиросеквенировали для области V4 рибосомной РНК 16S с использованием секвенатора нового поколения. Микробиота EF имела более высокое α -разнообразие и более широкие виды бактерий, чем микробиота VS, как в RIF, так и в контрольной группе. Анализ матриц расстояний UniFrac между EF и VS также выявил существенные различия в кластеризации.Кроме того, микробиота EF, но не микробиота VS, показала значительные различия в составе сообщества между группой RIF и контрольной группой. Виды Burkholderia не были обнаружены в микробиоте EF каких-либо образцов в контрольной группе, но были обнаружены в четверти группы RIF. Насколько нам известно, это первое исследование микробиоты в парных образцах EF и VS у бесплодных женщин с RIF.

1. Введение

Проект «Микробиом человека» показал, что бактериальные клетки составляют ~ 3% от общей массы тела человека и находятся на том же уровне, что и соматические клетки человека.В то время как бактериальные сообщества в организме человека вносят свой вклад в здоровье, их дисбаланс предрасполагает к широкому спектру заболеваний [1].

Классически известно, что виды Lactobacillus доминируют во влагалищной полости у женщин в пременопаузе [2]. Вагинальные Лактобациллы играют роль в поддержании и гомеостазе местной микробной среды, снижая pH за счет производства молочной кислоты. Между тем, полость матки человека долгое время считалась стерильной.Однако недавние исследования доказали наличие микробиоты в полости матки, которая также характеризуется преобладающим составом Lactobacillus [3–5]. Более того, было продемонстрировано, что статус Lactobacillus -доминирующей (90% или более) микробиоты в жидкости эндометрия (EF) был благоприятным для имплантации эмбриона в последующем in vitro оплодотворение-перенос эмбриона (ЭКО-ЭТ) лечение бесплодных женщин. Напротив, микробиота, отличная от Lactobacillus , связана с плохим репродуктивным исходом, включая неудачную имплантацию и выкидыш [6], подтверждая идею о том, что микробный состав эндометрия является ключевым фактором успешного процесса имплантации эмбриона.

Повторная неудачная имплантация (RIF) — это бесплодие, которое определяется как серийное неудачное зачатие после трех или более циклов переноса эмбрионов хорошего качества [7]. РИФ встречается у 15-20% бесплодных пар, проходящих программу ЭКО-ЭТ [8]. RIF потенциально возникает из аберрантных эмбриональных факторов (таких как хромосомные аномалии, количество митохондриальной ДНК и окислительный стресс) [9–12], нарушения рецептивности эндометрия (например, гидросальпинкса, полипов эндометрия, деформации полости матки и хронического эндометрита (ХЭ)) [ 13–16] и системные факторы (например, тромбофильные и иммунологические факторы) [17, 18].Несмотря на накопление доказательств того, что виды Lactobacillus необходимы для целостности среды как влагалища, так и полости матки, взаимосвязь между микробиотой вагинального секрета (VS) и аналогом EF у одних и тех же бесплодных людей остается в значительной степени неизвестной. Используя секвенирование следующего поколения, мы стремились сравнить разнообразие микробиоты в парных образцах EF и VS и охарактеризовать их дисбактериоз у пациентов с историей RIF.

2.Материалы и методы
2.1. Субъекты

Это был предварительный анализ продолжающегося исследования случай-контроль, которое было одобрено Этическим комитетом Институционального наблюдательного совета (номер разрешения 2017-02) и зарегистрировано в Медицинской информационной сети университетских больниц — Регистрация клинических испытаний, Япония. (UMIN000029449) 6 октября 2017 г. Согласно полученному письменному информированному согласию бесплодные пациенты с историей RIF (группа RIF) и пациенты, перенесшие первую попытку ЭКО (контрольная группа,) в центрах с большим объемом (> 2000 ооцитов) -количество заборов в год) были включены в исследование.Они прошли обследование на бесплодие, включая гистеросальпингограмму, гистероскопию, функции щитовидной железы, тромбофильные и иммунологические факторы. Согласно классификации Вика [19], морфологически хорошие эмбрионы на стадии дробления определялись как эмбрионы 3-го дня, 1-й или 2-й степени, семиклеточные эмбрионы. Согласно шкале Гарднера [20], морфологически хорошие бластоцисты определялись как бластоцисты 5-го дня с оценкой 3BB или выше. Хорионический гонадотропин человека в сыворотке крови (ХГЧ, Tosoh Co., Shunan, Japan) измеряли на одиннадцатый день после переноса эмбрионов третьего дня или на девятый день после переноса бластоцист пятого дня.Согласно инструкции производителя, значение менее 0,5 МЕ / л считалось отрицательным тестом на беременность. RIF был определен как серийный отрицательный тест на беременность после переноса пяти или более морфологически хороших эмбрионов на стадии дробления и / или бластоцист.

2.2. Сбор образцов

Образцы биопсии эндометрия получали в пролиферативной фазе (на 6-12 дни) менструального цикла с использованием кюретки шириной 3 мм (Atom Medical, Токио, Япония). На 6-8 дни после всплеска лютеинизирующего гормона в естественном цикле или триггера ХГЧ в цикле сбора ооцитов, или на 5 день после начала лютеиновой поддержки в цикле замещения гормона, были взяты парные образцы EF и VS, тщательно избегая контаминации. .Вкратце, промежность дважды очищали стерилизованными ватными тампонами, пропитанными раствором бензалкония хлорида. В полость влагалища медленно вводили двустворчатое зеркало, чтобы в достаточной степени визуализировать шейку матки. Образцы VS были получены из слизистой оболочки влагалища со всех сторон с использованием дополнительного тампона OMNIgene (DNA Genotek Inc., Оттава, ON, Канада) и солюбилизированы в пробирке для сбора, содержащей стабилизирующую жидкость (DNA Genotek Inc.). После удаления слизистой полость влагалища и шейку матки дважды очищали стерилизованными ватными шариками, пропитанными раствором бензалкония хлорида.Пипетку MedGyn Pipette IV (MedGyn Products Inc., Аддисон, Иллинойс, США) использовали для сбора образцов EF. Избегая контакта иглы со стенкой влагалища, пипетку медленно вводили из устья шейки матки в полость матки, пока она не достигла дна матки. Затем образцы EF осторожно аспирировали и помещали в другую пробирку для сбора.

2.3. Гистопатологические / иммуногистохимические исследования для CE

Образцы биопсии эндометрия фиксировали в течение ночи в 4% параформальдегиде (в фосфатном буфере, pH 7.3) и залит парафином. Срезы (толщина 4 мкм, мкм) на предметных стеклах депарафинизировали в лимонене (Falma Inc., Токио, Япония), регидратировали в градиентной серии этанола (в фосфатно-солевом буфере, pH 7,4) и подвергали предварительной микроволновой обработке. в цитратном буферном растворе (pH 6,0) на 5 минут для извлечения антигена и погружение в 3% перекись водорода на 5 минут для блокирования активности эндогенной пероксидазы. После промывки срезы замачивали в 10% эмбриональной сыворотке теленка (SAFC Biosciences, Lenexa, KS, USA) на 10 минут, чтобы минимизировать неспецифическое связывание антител, и инкубировали с готовыми к использованию мышиными моноклональными антителами IgG против CD138 человека (a маркер плазмацита, B-A38; Nichirei, Tokyo, Japan) или контрольный мышиный IgG.После трехкратной промывки иммунореактивность проявляли с использованием набора LSAB (Dako, Kyoto, Japan). После контрастного окрашивания гематоксилином срезы наблюдались опытным гинекологом-патологом под световым микроскопом (увеличение 400x). Стромальные клетки CD138 + с нуклеиновым гетерохроматиновым паттерном подсчитывали в 20 или более полях с высоким увеличением. Индекс плотности стромальных плазмоцитов эндометрия рассчитывали как сумму количества стромальных CD138 + клеток, деленную на количество оцениваемых полей высокой мощности.CE был диагностирован как 0,25 или более ESPDI, как описано ранее [21].

2.4. Экстракция и секвенирование ДНК

Образцы EF и VS обрабатывали протеиназой К (Beckman Coulter Inc., Бреа, Калифорния, США), содержащей 100 мг / мл раствора лизоцима (Sigma-Aldrich, Дармштадт, Германия) и 100 мг / мл. РНКаза А (Sigma-Aldrich). Геномную ДНК экстрагировали с использованием набора для выделения ДНК крови и сыворотки Agencourt Genfind v2 (Beckman Coulter Inc.). Концентрацию двухцепочечной ДНК количественно определяли флуорометрическим методом с помощью набора Qubit dsDNA HS Assay Kit (Thermo Fisher Scientific Inc., Уолтем, Массачусетс, США). Гипервариабельная область вариабельной области 4 (V4) бактериального гена 16S рРНК была амплифицирована из образца ДНК с использованием модифицированной пары праймеров, 515f (5-TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAGGTGYCAGCMGCCGCGGTAACNTAA-3) и 806rBGGATA-G-GTGAGTC (5GGAGTCV) и 806rBGGATA (5GGAGTC) Последовательности выступа адаптера Nextera XT (Illumina Inc., Сан-Диего, Калифорния, США) [22]. Полимеразную цепную реакцию (ПЦР) проводили с 25 нг ДНК, 200 мкг моль / л 4-дезоксинуклеотидтрифосфатов, 400 нмоль / л каждого праймера, 2.5 Ед полимеразы FastStart HiFi, 4% 20 мг / мл БСА, 0,5 моль / л бетаина и соответствующий буфер с MgCl 2 , поставляемый производителем (Sigma-Aldrich). Термический цикл состоял из начальной денатурации при 94 ° C в течение 2 минут, затем 30 циклов денатурации при 94 ° C в течение 20 секунд, отжига при 50 ° C в течение 30 секунд, удлинения при 72 ° C в течение 1 минуты и окончательного удлинения при 72 ° C. ° C в течение 5 минут. Смесь ампликонов очищали с использованием Agencourt AMPure XP (Beckman Coulter Inc.). Очищенные образцы ПЦР были мультиплексированы с использованием подхода двойного индекса с набором Nextera XT Index Kit v2 в соответствии с протоколом подготовки библиотеки метагеномного секвенирования Illumina 16S.ПЦР для индексации выполняли с помощью KAPA HiFi HotStart ReadyMix (Kapa Biosystems, Бостон, Массачусетс, США) в реакционном объеме 50 мкл л, а затем проводили очистку с помощью гранул Agencourt AMPure XP. Конечная библиотека была секвенирована парным концом с использованием набора реагентов MiSeq v3 на платформе Illumina MiSeq. Стандарт микробного сообщества ZymoBIOMICS (Zymo Research, Orange, CA, USA), содержащий смесь Pseudomonas , Escherichia , Salmonella , Lactobacillus , Enterococcus , Listeria и две дрожжи Listeria 20120, виды Saccharomyces и Cryptococcus использовали в качестве положительного контроля.Дистиллированная вода, не содержащая ДНКазы / РНКазы UltraPure ™ (Thermo Fisher Scientific Inc.) использовалась в качестве холостого контроля.

Используя EA-Utils fastq-join [23], была получена медианная длина объединенной последовательности из 291 пары оснований. Контроль качества объединенной последовательности выполняли с помощью USEARCH v10.0.240 [24] для удаления считываний PhiX, усечения последовательностей, связывающих праймер, и отбрасывания последовательностей длиной <100 п.н. Количественный анализ микробной экологии (QIIME) 1.9.1 [25] использовался с параметрами по умолчанию для качественной фильтрации, проверки химер, кластеризации последовательностей в рабочие таксономические единицы (OTU) и присвоения таксономии.Последовательности были сгруппированы в OTU с помощью стратегии выбора OTU с открытыми ссылками с использованием метода UCLUST на основе 97% идентичности последовательностей. Таксономия была присвоена каждой OTU с использованием классификатора проекта базы данных рибосом [26] с порогом достоверности 0,50 по сравнению с версией базы данных Greengenes 13_8 [27]. Следующие 15 бактериальных таксонов ( Acidovorax , Acinetobacter , Chryseobacterium , Citrobacter , Elizabethkingia , Escherichia , Flavobacterium 11

1

1

1

1

1 Janus1 Rhodococcus , Sphingomonas , Stenotrophomonas и Yersinia ), которые известны как контаминанты, обнаруженные в холостом контроле [28–30], были исключены из образцов ES с использованием QIIME.

2,5. Статистика

α -Разнообразие, включая индекс Шеннона, богатство Chao1 и наблюдаемые виды, было рассчитано на 1000-й последовательности в QIIME. Невзвешенные и взвешенные расстояния UniFrac были использованы для проверки филогенетического разнообразия β и графика анализа основных координат, основанного на разреженных последовательностях для 1000 [31]. Графики α, — и β -разнообразия были сгенерированы в QIIME, и β -различия между группами сравнивали с использованием перестановочного многомерного анализа дисперсии (PERMANOVA).Корреляционный анализ Пирсона применялся для сравнения микробиоты EF и VS у одного и того же человека. Был проведен точный тест Фишера для сравнения относительной численности таксонов между контролем и группой RIF. Значение менее 0,05 считалось статистически значимым.

3. Результаты
3.1. Характеристики пациентов с бесплодием

Демографические данные включенных в исследование пациентов с бесплодием были обобщены в таблице 1. Все пациенты были из населения Японии.В обеих группах не было курильщиков сигарет и женщин с ожирением (). ХЭ выявлен у 6 из 28 (21,4%) пациентов в группе РИФ и у 2 из 18 (11,1%) пациентов в контрольной группе. Распространенность CE была выше в группе RIF, чем в контрольной группе, но не достигла значимого уровня (относительный риск 1,93, 95% доверительный интервал от 0,43 до 8,53). Связи между CE и конкретной микробиотой EF / VS не было обнаружено в этой небольшой группе.

кг / м 2 ) () Сниженный резерв яйцеклеток 3,6%) 76 —

Группа РИФ () Контрольная группа ()

Возраст (лет) ()
Рождаемость (медиана (диапазон)) 0 (0-4) 0 (0-3)
Четность (медиана (диапазон) ) 0 (0-1) 0 (0-1)

Диагностика бесплодия a
Мужской фактор 8 (28.6%) 6 (33,3%)
Синдром поликистозных яичников 9 (32,1%) 4 (22,2%)
Эндометриоз 5 (17,9%) 4 (22,2%) 4 (22,2%)
Тубальный фактор 4 (14,3%) 5 (27,8%)
Необъяснимо 9 (32,1%) 3 (16,7%)
0 (0%)

Протокол контролируемой стимуляции яичников b
Короткий цикл агонистов GnRH 31 ()1%)
Длинный цикл агонистов ГнРГ 5 (0,7%)
Ультратонкий цикл агонистов ГнРГ 1 (0%)
Гибкий цикл антагонистов ГнРГ 41 (27,5%)
Цикл мягкой стимуляции 8 (0,7%)
Естественный цикл 2 (0%) 54
История переноса эмбрионов в прошлом ()
Количество циклов
Количество перенесенных эмбрионов 54
Количество использований вспомогательного хетчинга
Количество богатых гиалуронаном м edium use

Сноски: a Итого не 100%, так как у некоторых пациентов более одного диагноза b Итоговые данные не являются 100-процентными, так как некоторые пациенты проходят более одного цикла контролируемой стимуляции яичников / сбора ооцитов. Сокращения: РИФ: повторная неудача имплантации; SD: стандартное отклонение; ГнРГ: гонадотропин-рилизинг-гормон.

3.2. Результат секвенирования образцов EF и VS

Парные образцы EF и VS были получены из группы RIF (17 в естественном цикле, 4 в цикле захвата ооцитов и 7 в цикле замещения гормонов) и контрольной группы ( ; 8 в естественном цикле, 4 в цикле захвата ооцитов и 6 в цикле замещения гормона) и были подвергнуты секвенированию.Всего было получено 12 570 533 считывания последовательности со средним показателем 106 308 считываний на образец (диапазон 5 969–297 391) в EF и 166 965 считываний на образец (диапазон 60 484–535 057) в VS. Микробиота, полученная в EF, представляла собой в среднем 26 725 назначенных OTU последовательностей на образец (диапазон 1 065–43 657), тогда как микробиота, полученная в VS, была в среднем 37 712 последовательностей, назначенных OTU (диапазон 18 232–43 936).

3.3. Сравнение EF и VS микробиоты у бесплодных пациентов

Как EF, так и VS микробиота сильно коррелировали у одного и того же бесплодного индивидуума (средний коэффициент корреляции Пирсона для всех субъектов). α -Анализ разреженности показал, что индекс Шеннона был очень стабильным выше 100 последовательностей, что указывает на то, что было проведено достаточно секвенирования для анализа разнообразия как EF, так и VS микробиоты (рис. 1). Оценка индекса Шеннона показала, что микробиота EF (,) была более разнообразной (), чем микробиота VS (,) на 1000 считываний у бесплодных пациентов. Кроме того, количество видов бактерий, наблюдаемых в микробиоте EF (,), было значительно выше () по сравнению с таковым в микробиоте VS (,) в обеих группах (Рисунок 1).Богатство бактериального сообщества, измеренное по богатству Chao1, было выше () в микробиоте EF () по сравнению с микробиотой VS (). Анализ дисперсии для разделения матриц расстояний UniFrac между EF и VS выявил существенно различающуюся кластеризацию () (рис. 2).

3.4. Сравнение микробиоты EF и VS между группой RIF и контрольной группой

Индекс Шеннона микробиоты EF в группе RIF (,) был значительно ниже (), чем в контрольной группе (,) (Рисунок 3).Индекс Шеннона микробиоты VS в группе RIF (,) был сопоставим () с таковым в контрольной группе (,). Невзвешенное расстояние UniFrac бактериального сообщества в микробиоте EF показало значительную разницу между группой RIF и контрольной группой (). Между тем, невзвешенное расстояние UniFrac бактериального сообщества в микробиоте VS было одинаковым между двумя группами () (Рисунок 4).

3.5. Сравнение видов бактерий в микробиоте EF и VS между группой RIF и контрольной группой

Преобладающая микробиота EF с Lactobacillus , определяемая по статусу рода> Lactobacillus , чаще наблюдалась в группе RIF (64 .3%, 18/28), чем в контрольной группе (38,9%, 7/18), хотя разница не достигла значимого уровня (отношение шансов 2,83, 95% ДИ 0,83–9,61) (Рисунок 5). Аналогичные результаты были получены для микробиоты VS, где 67,9% (19/28) в группе RIF и 44,4% (8/18) в контрольной группе представляли микробиоту с преобладанием Lactobacillus (отношение шансов 2,64, 95% ДИ 0,78- 8.96). Частота обнаружения Gardnerella в микробиоте EF составила 39,3% (11/28) в группе RIF и 27,7% (5/18) в контрольной группе (, отношение шансов 1.68, 95% ДИ 0,47-6,05). Burkholderia не была обнаружена ни в одной из микробиоты EF в контрольной группе (0/18), но была обнаружена в 25% (7/28) группы RIF (, отношение шансов 12,91). Не было значительных различий в частоте обнаружения конкретных видов бактерий в микробиоте VS между двумя группами.


(a) Микробиота EF
(b) Микробиота VS
(a) Микробиота EF
(b) Микробиота VS
4.Обсуждение

Несколько исследователей оценили бактериальные сообщества в эндометрии и влагалище, используя микробиоту у бесплодных женщин с различными причинами [4, 6, 32–37]. Насколько нам известно, это первое исследование микробиоты в парных образцах EF и VS у бесплодных пациентов с историей RIF.

Мы демонстрируем, что виды бактерий в EF и VS похожи у одного человека. Однако измерения разнообразия, такие как индекс Шеннона, наблюдаемые виды и богатство Chao1, показывают, что EF имеет более высокое α -разнообразие, чем VS.Этот вывод был подтвержден анализом расстояния UniFrac, который продемонстрировал, что бактериальные сообщества довольно сильно различались между EF и VS. Хотя возможное влияние процедуры биопсии эндометрия на последующий статус образца EF / VS нельзя полностью отрицать, мы обнаружили обнадеживающие результаты, что в день аспирации EF / VS не было истончения эндометрия или кровотечения.

Интересно, что Burkholderia не выявлялась у бесплодных женщин, перенесших первую попытку ЭКО-ЭТ, но у четверти женщин с РИФ в анамнезе. Burkholderia — это род Proteobacteria, членами которого являются Burkholderia pseudomallei , микроорганизм, ответственный за мелиоидоз [38], и Burkholderia cepacia , патоген, вызывающий серьезные легочные инфекции у пациентов с муковисцидозом [39]. Burkholderia обычно устойчива ко многим антибиотикам [40]. Литература об этой бактерии в женском репродуктивном тракте человека скудна. В то время как некоторые исследования продемонстрировали, что видов Burkholderia являются обычными загрязнителями окружающей среды, которые часто обнаруживаются в полости матки пользователей внутриматочной противозачаточной системы с левоноргестрелом [41], отчет о случае показывает, что Burkholderia может быть одним из потенциальных патогенов, вызывающих тубовариальный абсцесс. [42].Влияние Burkholderia на рецептивность эндометрия требует дальнейшего изучения.

Эндометрий человека регулируется на протяжении всего менструального цикла под влиянием стероидов яичников. Предыдущие отчеты показали, что профили микробиоты эндометрия были стабильными в течение менструального цикла, между менструальными циклами и во время перехода от прецептивной фазы (LH + 2) к рецептивной фазе (LH + 7) у большинства женщин. Однако некоторые колебания наблюдались в приобретении рецептивности эндометрия у части (4 из 22) субъектов [6, 33].Сила нашего исследования заключается в том, что мы зафиксировали период отбора проб эндометрия на периоде имплантации (на 6-8 день после естественного выброса лютеинизирующего гормона или триггера ХГЧ или на 5 день после начала лютеиновой поддержки в цикле замещения гормона). В то время как доля патогенов была на одинаковом уровне между парными образцами EF и VS, между людьми наблюдались заметные различия. Одним из потенциальных факторов, влияющих на эту дисперсию, является включение трех разных типов циклов (естественный цикл, цикл, запускаемый ХГЧ, и цикл заместительной гормональной терапии).

Ограничение этого исследования состоит в том, что дизайн исследования является перекрестным. Учитывая, что контрольная группа (бесплодные пациенты, перенесшие первую попытку ЭКО-ЭТ) может включать некоторую проспективную когорту RIF, требуются продольные исследования. Потенциальная систематическая ошибка — контаминация секрета эндоцервикального канала и VS в процессе отбора проб EF [3, 4], хотя микробиота EF не подозревалась в происхождении из микробиоты VS, поскольку были отмечены некоторые различия в бактериальном сообществе между EF. и образцы VS у одних и тех же людей.Связь между CE и микробиотой EF / VS ожидается у бесплодных женщин с RIF, но мы не смогли найти ее в этой небольшой выборке. Для оценки взаимосвязи между микробиотой женского репродуктивного тракта и CE требуются более масштабные исследования.

5. Выводы

Насколько нам известно, это первое исследование микробиоты в парных образцах EF и VS у бесплодных женщин с историей RIF, а также у женщин, перенесших первую попытку ЭКО-ЭТ.Эта работа облегчит понимание микробной этиологии женских половых путей у бесплодных пациентов с РИФ.

Доступность данных

Данные, использованные для подтверждения результатов этого исследования, включены в статью.

Раскрытие информации

Эта работа была частично представлена ​​на 74-м ежегодном собрании Американского общества репродуктивной медицины, Денвер, Колорадо, США.

Конфликты интересов

Конфликты интересов, о которых следует заявлять относительно публикации этой статьи, отсутствуют.

Вклад авторов

Котаро Китайя и Йоко Нагай внесли равный вклад в исследование.

19204747

% PDF-1.6 % 1 0 obj > / OCGs [5 0 R 6 0 R 7 0 R 8 0 R] >> / Контуры 3 0 R / Страницы 4 0 R / StructTreeRoot 9 0 R / Тип / Каталог >> эндобдж 10 0 obj > поток 2021-03-30T15: 37: 57-07: 002018-02-28T13: 51: 01-08: 002021-03-30T15: 37: 57-07: 00Appligent AppendPDF Pro 5.5uuid: f33a3799-a80c-11b2-0a00- 782dad000000uuid: 2424d93e-1dd2-11b2-0a00-1e002861b9ffapplication / pdf

  • 19204747
  • Mac OS X 10.13.2 Quartz PDFContextAppendPDF Pro 5.5 Ядро Linux 2.6 64-битная 2 октября 2014 Библиотека 10.1.0 конечный поток эндобдж 2 0 obj > эндобдж 3 0 obj > эндобдж 4 0 obj > эндобдж 9 0 объект > эндобдж 18 0 объект > эндобдж 12 0 объект > эндобдж 13 0 объект > эндобдж 14 0 объект > эндобдж 15 0 объект > эндобдж 16 0 объект > эндобдж 17 0 объект > эндобдж 57 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> эндобдж 58 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> эндобдж 59 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> эндобдж 60 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> эндобдж 61 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> эндобдж 62 0 объект > / Ресурсы> / Шрифт> / ProcSet [/ PDF / Text] / Свойства >>> / Повернуть 0 / Thumb 137 0 R / TrimBox [0.0 0,0 246,0 680,4] / Тип / Страница >> эндобдж 63 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] / Properties >>> / Rotate 0 / Thumb 155 0 R / TrimBox [0.0 0.0 504.875 549.614] / Type / Page >> эндобдж 64 0 объект > / Resources> / ExtGState> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC / ImageI] / Properties> / XObject >>> / Rotate 0 / Thumb 163 0 R / TrimBox [0.0 0.0 280.079 345.946] / Type / Page >> эндобдж 65 0 объект > / ExtGState> / Font> / Pattern> / ProcSet [/ PDF / Text] / Properties >>> / Rotate 0 / Thumb 177 0 R / TrimBox [0.



    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *